[发明专利]一种新的多肽——人CHS蛋白12.43和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人CHS蛋白12.43，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

CHS是一种少见的，常染色体隐性遗传疾病。该病患者患有嗜中性白细胞减少症和缺乏自然杀伤细胞免疫疾病，并且有流血倾向和神经系统异常，大多数患者死于儿童期[Beguez-esar，A.B.(1943)Bol.Soc.Cubana Pediatr.15.900-922][Hig ashi，O.Tohoku(1954)J.Exp.Med.59，315-332]。CHS的许多细胞类型的细胞器中含有巨大的内含物[Zhao，H.et al.(1994)Lab.Investig.71，25-34]，在beige鼠中也出现了上述的异常症状，因此可能成为研究人类CHS的模型[Penner，J.D.& Pri eur，K.J.(1987)A m.J.Med.Gen et al.，.28，445-454]。生物学家已经测出与beige鼠beige蛋白同源的人类CHS蛋白的cDNA序列。

人类CHS蛋白的mRNA翻译起始密码位于190nt；有一个11，403bp的开放阅读框编码3，801个氨基酸，分子量为429，153；终止密码位于11，592nt，接下来是大量的终止密码和一个位于3’非编码区(1，933bp)的poly(A)尾巴。人类CHS蛋白有一个非常有意义的保守比邻区域，它有两个分离的与C.elegans基因组物理相连的位点。位于3116-3461之间的氨基酸是功能区和特定结构域区。我们把这个保守结构域称为BEACH结构域，因为该区域在不同的CHS蛋白中都高度保守，并且其长度比蛋白质与蛋白质之间反应结构域还要长，含有α-β折叠和保守氨基酸[Peru，C.M.et al.，(1996)Nature Genet.13.303-308]。

人类CHS蛋白包含大量的能为研究其生化功能提供线索的结构域。CHS蛋白由一系列的疏水转角结构组成，其中一些散布的疏水区域并不代表转膜结构域但与转膜结构域相关。这些转角结构很象ARM和HEAT重复子结构域。许多包含HEAT重复子结构域的蛋白质都与小泡转运有关[DiFiglia，M et al.，(1995)Neur ons14，1075-1081]。人类CHS蛋白的C末端包含7个连续的WD40结构域。这些WD40结构形成β片层，能调节蛋白质与蛋白质之间的反应。人类CHS蛋白的上述结构表明它是一个细胞质蛋白并且与小泡转运有关。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与人CHS蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人CHS蛋白12.43。

由于如上所述人CHS蛋白12.43蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人CHS蛋白12.43蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人CHS蛋白12.43蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人CHS蛋白12.43以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人CHS蛋白12.43的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人CHS蛋白12.43的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人CHS蛋白12.43的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人CHS蛋白12.43的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人CHS蛋白12.43的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人CHS蛋白12.43异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；