[发明专利]从动物血液中提取血红素的方法

说明书

本发明涉及一种血红素的提取方法，特别是涉及一种利用血红素在不同酸碱度溶液中溶解性不同的性质提取血红素的方法。

血红素是从猪血或其它动物血液中提取出来的一种含铁的卟啉化合物，它是制备抗癌特效药——血卟啉衍生物药物的主要原料，也是一种高效的天然补Fe²⁺剂，可用于治疗缺铁性贫血和铅中毒，还可以作为食品制作中的色素添加剂，应用范围十分广阔，市场上供不应求。

关于血红素的提取方法，迄今已有多种方法报导。其中最常用的方法是冰乙酸法，该方法是将动物血液与冰乙酸、NaCl混合后，在90℃下加热回流，静置得到血红素结晶，经洗涤干燥后获得产品，其中的冰乙酸经蒸馏回收后再循环利用。目前的工业生产中大都采用此方法，但其缺点是冰乙酸耗用量大，成本高，而且从溶解有蛋白质的冰乙酸废液中蒸馏回收冰乙酸，处理比较困难。丙酮盐酸法是另外一种提取血红素的常用方法，该方法需要采用新鲜的动物血液作为原料，即需要在新鲜血液中加入抗凝血剂柠檬酸钠，放置分层，除去上层血清后，利用新鲜的血细胞作为提取原料，用盐酸丙酮溶液提取血细胞中的血红素，过滤除去沉淀物后，滤液中加入醋酸钠的氢氧化钠溶液，静置析出血红素沉淀，洗涤干燥后获得产品。该方法得到的血红素产品纯度不高，需要进一步精制，而且工艺中丙酮用量很大，由于丙酮是易挥发物质，使得工艺操作和设备要求比较严格苛刻，工艺制备比较复杂。

碱基物有机溶剂法和离子交换法是另外两种提取血红素的方法。碱基物有机溶剂法是利用含碱基物质的有机溶剂，使得血细胞中的珠蛋白与血红素分离从而获取血红素的方法，其中的碱基试剂如二乙氨、吡啶等有机胺对人体有毒副作用，有机溶剂的挥发性也比较大，特别是在血红素的制备操作中需要反复多次进行离心、升温和降温，步骤繁琐、复杂，使生产成本增加许多。离子交换法是将血红素吸附在离子交换树脂上，再用适当的洗脱剂解吸下来的制备血红素方法，离子交换法获得的血红素纯度较高，但是该方法制备数量有限，需要耗用大量的淋洗剂和解吸剂，而且离子交换树脂使用几次后需要进行再生处理，制备工艺比较复杂。

本发明的目的是提供一种简便、快速提取血红素的方法，以适合工业化大批量生产。

本发明是利用血红素能够溶解于碱性溶液中的性质，在由除去血清的凝固血块制成的血匀浆中加入碱性溶液，搅拌使血红素充分完全溶解到碱性溶液中，与不溶于碱性溶液的珠蛋白分离，过滤除去珠蛋白后的滤液用盐酸调节pH=2-3，静置使析出血红素沉淀，收集沉淀，经洗涤烘干后，得到纯的血红素产品。

经过试验，发现多种不同组合的碱性溶液都具有使血红素与珠蛋白分离的作用，本发明采用的碱性溶液是下述溶液组合中的一种：

a)1mol/L(NH₄)₂SO₄碱性溶液，称取132g(NH₄)₂SO₄，用0.4mol/LNaOH溶液溶解并定容至1000mL；

b)1.5mol/L NaCl碱性溶液，称取87gNaCl，用0.4mol/L NaOH溶液溶解并定容至1000mL；

c)1mol/L Na₂SO₄碱性溶液，称取117gNa₂SO₄，用0.4mol/L NaOH溶液溶解并定容至1000mL；

d)1mol/L Zn(OH)₂碱性溶液，称取99gZn(OH)₂，用0.4mol/L NaOH溶液溶解并定容至1000mL；

e)0.8mol/L CuSO₄碱性溶液，称取200g CuSO₄·5H₂O，用0.4mol/LNaOH溶液溶解并定容至1000mL；

f)0.5mol/L Pb(Ac)₂碱性溶液，称取135gPb(Ac)₂，用0.4mol/L NaOH溶液溶解并定容至1000mL；

g)60％碱性丙酮溶液，0.4mol/L NaOH溶液400mL与600mL丙酮混合；

h)70％碱性甲醇溶液，0.4mol/L NaOH溶液300mL与700mL甲醇混合；

f)60％碱性乙醇溶液，0.4mol/L NaOH溶液400mL与600mL乙醇混合；