[发明专利]头部创伤诱导的胞质钙结合蛋白

说明书

发明所属技术领域

本发明涉及人类急性神经元的诱导的钙结合蛋白和鉴定及编码该蛋白质的多聚核苷酸(ANIC-BP)。本发明还提供了表达载体，宿主细胞和抗体。此外，本发明提供了用于产生该蛋白质的方法及治疗和预防与该蛋白质的表达有关的疾病。本发明还涉及抑制或者激活这种多聚核苷酸和多肽的作用。

发明背景

中风和急性头部创伤，多发性硬化以及脊髓伤害是迄今为止没有任何现成疗法的疾病。中风是第三大死亡原因，对患者以及社会负担巨大。如果发生占中风大部分的局部中风的话，脑部血管堵塞是初发事件。头创伤事故是西方世界年青人的主要疾病，很少数量的病人受由机械撞击和动脉破裂引起的出血性中风的影响，一个共有的特征是批准的药物很少可供使用。当前可供使用的治疗方法是建立在病理生理概念之上的，该概念来源于病灶性大脑局部缺血的实验工作。这些方法包括动脉再造管术，对炎症过程的抑制和神经保护的药理学策略。用动脉再灌注策略的进一步研究正在进行之中。正在完成用依赖于多形核白细胞的内皮粘连受体拮抗药的早期临床研究，但尚需提出策略。然而，只解决局部缺血级联过程中单一步骤的任何策略可能仅仅产生一个不大的疗效。因此，未来的疗法最适当地将基于结合疗法。低剂量的乙酰水杨酸和释放改进的双嘧达氨醇的结合在中风的次级预防中已表明具有累加效应。(Tijssen等.国际临床学业者杂志增刊。91，14-16，1997)。目前提出的供临床评价的另一组合是tPA加上一种有效的神经保护因子。然而，这些研究的结果还远远不是非常有效的。因此，急需了解更多的病理生理机制以便提供药物目标，该目标可被用来研制新的药物和建立更通用的治疗患有急性神经损伤和疾病如多发性硬化的患者的方法。

本发明确实是集中于Ca²⁺钙结合蛋白质，因为对Ca²⁺结合蛋白质在神经保护中的作用有大量的证据。虽然钙结合蛋白质(CaBPs)的精确功能还不肯定，但已提出了钙结合蛋白的作用是可缓冲细胞间Ca²⁺的水平(浓度)。由于钙离子的过度负荷激活了导致蛋白水解作用和线粒体功能紊乱的生化过程，钙结合蛋白的这一缓冲能力对兴奋中毒的神经元损伤可能有保护效果(Heizmann等TINS，15，259-64，1992)。存在各种各样的证据，支持钙结合蛋白的这一假设的、在钙水平的调节中和神经保护中的作用。

在中枢神经系统中表达的(小白蛋白(pavalbumin)，钙结合蛋白-D28K，和钙视网膜蛋白)主要Ca²⁺结合蛋白(CaBPs)在各种神经元群体中具有十分不寻常的和选择性的表达模式。在确实表达CaBPs的神经元中，大部分只表达一种类型，虽然少量的神经元表达不止一种的主要钙结合蛋白。有不断增加的证据表明，在特殊的细胞类型中，存在或者缺乏钙结合蛋白(CaBPs)是构成被称为选择易受伤性这一现象的基础。选择易受伤性是一种特殊类型的神经元对中枢神经系统(CNS)损伤反应而死亡的性质。例如，CA1海马神经元是有选择地易受球面局部缺血的损伤，小脑浦肯野氏(purkinje)细胞有选择地易受头部创伤，中风，胎儿酒精暴露的损伤，同时在黑质中的神经元在帕金森疾病中是有选择地易受损伤的。已经努力地把选择性的神经元易受伤性与各种CaBPs表达模式联系起来，有些作者报告在选择性地易受损伤的神经元的群体中发现了高浓度的CaBPs，而其它则报告对损伤选择性抵抗的神经元群体中有较高浓度的CaBP。例如，据报导，高水平表达的小白蛋白(parvalbumin)的神经元选择性地易受AMPA-诱导的毒性的损伤(Weiss等.神经学，40，1288-1292，1990)，而表达高水平的钙结合蛋白-D28K的培养的海马神经元据报导对谷氨酸诱导的毒性有选择性的抵抗性(Baimbridge等.TINS，15，303-8，1992)。类似地，表达高水平的钙视网膜蛋白的海马神经元能抵抗有毒性剂量的兴奋毒素谷氨酸，NMDA，红藻酸和使君子氨酸((Winsky等，在《新的钙结合蛋白质》中，277-300，1991)。