[发明专利]用于脂质体中的有可裂解键的缀合物

说明书

                  发明所属的技术领域

本发明涉及一种缀合物(conjugate)，其中由疏水性部分、可裂解的键和治疗剂构成。更特别的是，本发明涉及一种缀合物，由脂质、可分离的键和药物构成，其掺入脂质体制剂中。在体内温和的硫解条件下，缀合物可以裂解，释放出未经修饰状态的药物。

                   本发明的技术背景

脂质体是用于各种治疗目的的封闭的脂质微囊，尤其通过脂质体的系统给药将治疗剂传送到靶区域或靶细胞。在表面接枝有水溶性的、生物可耐受的聚合物-尤其是聚乙二醇-的链的脂质体，已成为重要的药物载体。这些脂质体提供比缺少聚合物覆盖的脂质体更长的血液循环周期。接枝的聚合物的链屏蔽或遮盖脂质体，因此减少与血浆蛋白质的相互作用。因而降低体内脂质体清除或消除的速度，因为脂质体循环不能被巨噬细胞和网状内皮系统的其他细胞识别。还因为所谓的增强的渗透性和保留效果，脂质体趋向于聚集在受到破坏的部位和扩张的脉管系统，如肿瘤和炎症部位。

通常需要延长的血液循环周期以使全身给药的脂质体到达靶区域、细胞或部位。例如，针对肿瘤部位的脂质体治疗优选长于12小时的血液循环周期，因为脂质体必需在系统中分布，然后渗透到肿瘤区域。

以脂质体为基础的治疗涉及的一个问题是，药物在脂质体中保留足够的时间以达到系统分布。当用长期循环的脂质体-如有接枝的聚合物链的脂质体-给药时，尤其涉及此问题。只有少数的药物能长时间地在脂质体中有效地荷载和保留，并随后释放。

促进药物保留的一种途径是选择脂质双层组分，使双层结构有较少的渗透性以截留药物。然而，脂质双层应有充分的流动性以使药物释放，例如，在所需时间，如在靶部位定位后或经过充分的生物分布后，借助通过脂质双层的传送或脂质微囊的破裂而使药物释放。

另一个促进药物保留的努力是将药物共价结合在脂质体的脂质双层结构中的脂质上(Waalkes，等，《癌症的选择疗法》，6：15-22(1990)；Asai，等，《生物药学通报》(Biol.Pharm.Bull.)21：766-771(1998))。

期望配制一种脂质体组合物，它有长的血液循环周期，并能将截留的药物保留所需的时间，还能按需要释放药物。本领域为实现这些特点而进行的努力，已从不形成微囊的脂质制备了一种脂质体，如二油酰基磷脂酰乙醇胺(DOPE)，和脂质双层稳定的脂质，如甲氧基-聚乙二醇-二硬脂酰基磷脂酰基乙醇胺(mPEG-DSPE)(Kirpotin，D，等.，FEBSLett.388：115-118(1996))。在这些尝试中，mPEG通过可裂解的键连接在DSPE上。此键的裂解可以影响脂质体的稳定性，从而快速释放脂质体中的内容物。

已公开了将PEG聚合物连接到脂质体的不稳定的键(美国专利5,013,556，5,891,468；国际申请WO 98/16201)。在这些脂质体组合物中的不稳定的键从脂质体中释放PEG聚合物链，例如，暴露一个有靶配体连接的表面或引起脂质体与靶细胞的融合。

然而至今还未产生一种方法，能够在适于体内使用的条件下，使聚合物链从脂质体断开。例如一些可裂解的链需要蛋白质硫解剂-如1，4-二硫苏糖醇，以释放聚合物链。这些还原剂是不能在体内使用的。已知的用可裂解的键将PEG连接到脂质体脂质的另一个问题是：可解除的键的裂解产生非天然的和不期望的被修饰的脂质。相应地，本领域需要一种可裂解的键，适于体内使用并且在裂解后产生天然的、未经修饰状态的药物或治疗剂。

在EP 0317957中，Senter记载了一种药物-抗体药物前体，其中用二硫化物苄基氨基甲酸酯或碳酸酯链接将抗体与药物相连接，二硫键的还原会影响药物的释放。Senter的学说对于在还原剂-如1，4-二硫苏糖醇、谷胱甘肽、NADH和NADPH-的作用下，药物-配体药物分子的裂解是特殊的。当将药物掺入通过血液而循环的脂质体中时，不能根据Senter公开的内容而预知这种连接的行为。例如在脂质体中，聚合物和脂质之间的连接将埋藏或掩蔽在PEG外层中。相对容易想象如在Senter的文献中的单一药物-配体药物前体的释放；然而，当在脂质体表面包裹聚合物链而形成部分浓密的屏障时，连接的释放是不易预见的。

如上所述，延长的血液循环时间是PEG包裹的脂质体的理想特性，血液循环寿命长于12小时对于针对肿瘤区域的脂质体疗法是优选的。Senter公开的文献未提供在内源性的还原条件下，如在脂质体的血液循环中，对于掺入到脂质体中的缀合物的释放动力学的指导。

发明概述