[发明专利]蛋白质的分配方法

权利要求书

1.在双水相萃取系统(ATPS)中分配蛋白或细胞的方法，其包括以下步骤：

a)为了获得融合蛋白或细胞，使目标蛋白或细胞与靶向蛋白组合，其中所述靶向蛋白选自能在ATPS系统中分配并携带所述目标蛋白或细胞至所述相之一中的两亲性和疏水蛋白，且

b)使携带靶向蛋白的上述融合蛋白或细胞在ATPS中分离。

2.权利要求1的方法，其中所述靶向蛋白是疏水蛋白或疏水蛋白样蛋白或其一部分。

3.权利要求2的方法，其中所述疏水蛋白是木霉属疏水蛋白或其一部分。

4.权利要求3的方法，其中所述木霉属疏水蛋白是HFB I、HFB II或SRH I，或它们的一部分。

5.权利要求1的方法，其中所述两亲性蛋白或疏水蛋白或其一部分形成集合物。

6.权利要求1-5中任一项的在ATPS中分配细胞的方法，其中在权利要求1的步骤a)中，使目标细胞与靶向蛋白组合包括将所述靶向蛋白带到所述细胞的表面。

7.权利要求6的方法，其中所述细胞是酵母细胞。

8.权利要求6的方法，其中所述细胞是孢子。

9.权利要求6-8中任一项的方法，其中所述靶向蛋白与能将该靶向蛋白带到细胞表面的蛋白融合。

10.一种融合蛋白，其含有权利要求2-5中任一项限定的疏水蛋白或疏水蛋白样蛋白，且所述疏水蛋白或疏水蛋白样蛋白与目标蛋白融合。

11.权利要求10的融合蛋白，其中所述目标蛋白是细胞结合型蛋白或其一部分。

12.权利要求10的融合蛋白，其中所述目标蛋白是细胞外蛋白或其一部分。

13.权利要求12的融合蛋白，其中所述细胞外蛋白是木霉属的细胞外蛋白，其选自纤维素酶，半纤维素酶和蛋白酶。

14.权利要求10的融合蛋白，其中所述目标蛋白是抗体蛋白或其一部分。

15.权利要求1的方法，其中所述靶向蛋白与权利要求10-14中任一项所述目标蛋白融合。

16.一种重组生物，其产生权利要求10-14中任一项所述融合蛋白。

17.权利要求16的重组生物，其中所述重组生物经过遗传修饰能产生权利要求10-14中任一项所述的融合蛋白。

18.一种重组DNA分子，其含有编码权利要求10-14中任一项所述融合蛋白的DNA分子。

19.利用重组生物产生权利要求10-14中任一项所述融合蛋白的方法，其包括以下步骤

a)用能表达所述蛋白的DNA分子转化所述生物，和

b)从所述重组生物的培养物中回收所述蛋白。

20.权利要求1-9及15中任一项的方法，其中所述双水相萃取系统选自PEG/盐，PEG/葡聚糖和PEG/淀粉系统或它们的衍生形式，基于去污剂的双水相萃取系统和热分离聚合物系统。

21.权利要求20的方法，其中所述基于去污剂的ATPS包含一种选自非离子或两性离子去污剂的去污剂。

22.权利要求20的方法，其中所述热分离聚合物系统包含选自聚乙烯-聚丙烯共聚物的聚合物。

23.权利要求1-9及15中任一项的方法，其中所述目标蛋白或细胞分离自含有细胞或细胞提取物的悬浮液。

24.在双水相萃取系统中分离疏水蛋白或疏水蛋白样蛋白或其一部分的方法，其包括以下步骤

a)使含有所述疏水蛋白，疏水蛋白样蛋白或其一部分的溶液与形成该相的化学物质混合，和

b)实施ATPS分离，

其中所述双水相萃取系统如权利要求20-22中任一项所述限定。