[发明专利]α-淀粉酶变体有效
| 申请号: | 00805949.7 | 申请日: | 2000-03-28 |
| 公开(公告)号: | CN1346404A | 公开(公告)日: | 2002-04-24 |
| 发明(设计)人: | 卡斯滕·安德森;克里斯特尔·T·乔根森;亨里克·比斯加德-弗兰岑;艾伦·斯文德森;索伦·杰拉尔夫 | 申请(专利权)人: | 诺维信公司 |
| 主分类号: | C12N9/28 | 分类号: | C12N9/28;C11D3/386 |
| 代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 | 代理人: | 巫肖南 |
| 地址: | 丹麦*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 淀粉酶 变体 | ||
1.一种亲本Termamyl-样α-淀粉酶的变体,其在选自下组的一或多个位置处包含改变:W13,G48,T49,S50,Q51,A52,D53,V54,G57,G107,G108,A111,S168,M197,其中(a)所述每一改变是
(i)在占据此位置的氨基酸下游插入氨基酸,
(ii)占据此位置的氨基酸的缺失,或
(iii)占据此位置的氨基酸用另一氨基酸取代,(b)所述变体具有α-淀粉酶活性且(c)每一位置对应于具有SEQ ID NO:4之氨基酸序列的亲本Termamyl-样α-淀粉酶氨基酸序列的位置。
2.权利要求1的变体,其包含一个突变,该突变的位置对应于SEQ IDNO:4中所示氨基酸序列中至少一个下列突变:V54N,A52S,A52S+V54N,T49L,T49+G1 07A,A52S+V54N+T49L+G107A,A52S+V54N+T49L,G107A,Q51R,Q51R+A52S,A52N;或T49F+G107A,T49V+G107A,T49D+G107A,T49Y+G107A,T49S+G107A,T49N+G107A,T49I+G107A,T49L+A52S+G107A,T49L+A52T+G107A,T49L+A52F+G107A,T49L+A52L+G107A,T49L+A52I+G107A,T49L+A52VG107A;或T49V,T49I,T49D,T49N,T49S,T49Y,T49F,T49W,T49M,T49E,T49Q,T49K,T49R,A52T,A52L,A52I,A52V,A52M,A52F,A52Y,A52W,V54M,G107V,G107I,G107L,G107C。
3.权利要求1或2的变体,其包含一个突变,该突变的位置对应于SEQID NO:4中所示氨基酸序列中的至少一个下列突变:
W13F,L,I,V,Y,A;
G48A,V,S,T,I,L;
*48aD或*48aY(即D或Y的插入);
T49X;
*49aX(即任何氨基酸残基的插入);
S50X,尤其D,Y,L,T,V,I;
Q51R,K;
A52X,尤其A52S,N,T,F,L,I,V;
D53E,Q,Y,I,N,S,T,V,L;
V54X,尤其V54I,N,W,Y,F,L;
G57S,A,V,L,I,F,Y,T;
G107X,尤其G107A,V,S,T,I,L,C;
G108X,尤其G108A,V,S,T,I,L;
A111V,I,L;
S168Y;
M197X,尤其Y,F,L,I,T,A,G。
4.权利要求1-3中任一项的变体,其包含下列突变,所述突变对应于SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列中的至少一个下列突变:
T49X+A52X+V54N/I/L/Y/F/W+G107A
5.权利要求1-4的变体,其进一步含有G108A。
6.权利要求1-5的变体,其包含下列突变,所述突变对应于SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列中的至少一个下列突变:
T49L+G107A;
T49I+G107A;
T49L+G107A+V54I;
T49I+G107A+V54I;
A52S+V54N+T49L+G107A;
A52S+V54I+T49L+G107A;
A52S+T49L+G107A;
A52T+T49L+G107A;
A52S+V54N+T49I+G107A;
A52S+V54I+T49I+G107A;
A52S+T49I+G107A;
T49L+G108A;
T49I+G108A;
T49L+G108A+V54I;
T49I+G108A+V54I
7.权利要求1-6中任一项的变体,其中该变体与亲本α-淀粉酶相比,降低了在靠近分支点酶解寡糖底物的能力。
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