[发明专利]免疫调制聚合物

说明书

本发明的领域

本发明涉及调制免疫反应的免疫调制剂和方法。本发明还涉及激活T细胞，诱导IL-2，使受试体免于遭受细菌感染或污染引起的脓肿的形成，及在受试体内减少术后外科粘连的形成。

本发明的背景

结肠细菌泄漏到腹膜中引起的常见并发症是腹内脓血症和脓肿形成。脓肿是细菌，淋巴细胞，巨噬细胞，多形核白细胞，白细胞和血纤蛋白的囊包聚集物，在组织或体腔内由于细菌侵扰或污染而形成的，如在外科手术过程，外伤或疾病期间如阑尾炎或癌症出现。暴露躯体区域细菌的入侵可能发生在腹腔，腹膜后空间，骨盆或其他空间内或身体内器官的局部区域。感染组织区域保持着对不能渗透组织结构的并有效地清除远离壁的细菌的抗生素的相关免疫。如果脓肿保持不治疗，它可能引起发热，延长住院治疗，在一些情况下会死亡。如果脓肿破裂，它会将其细菌内容物释放到腹腔内，这样会接着导致这些患者的脓血症复发。通常，当实施腹部手术时，可预防以及术后服用抗生素。然而，一旦脓肿形成，最有效的方法是进一步手术干涉，以除去讨厌的脓肿，这是一个耗时又昂贵的过程。

使患者对脓肿形成免疫，如在腹部内手术的情况下一直是不切实际的，因为有太多的能引起脓肿形成的细菌菌株，而对一种细菌的抵抗作用不会具有抵抗另一种细菌的性能。此外，接种疫苗和随后的免疫反应诱导是否会对任何具体细菌引起的脓肿形成都有充分的抵抗作用还未确定。并且，对于人类还存在与服用活的或减毒细菌菌株有关的问题和危险，进一步阻碍了制备含有多种不同细菌的疫苗的努力。

在人类的一些细菌致病源的表面可发现覆盖着荚膜多糖。多糖已定性为不依赖于T细胞的抗原，仅引起体液抗体反应。尽管多种多糖已显示出是免疫原性的，但一些多糖最好也不过是弱免疫原性的。

类杆菌属(Bacteroides fragilis)是从腹内脓肿分离出来的起支配作用的厌氧生物。荚膜多糖复合物(CPC)已确定为引发脓肿形成的类杆菌属(B.fragilis)区域。这种碳水化合物复合物覆盖在类杆菌属(B.fragilis)表面。单独的分离复合物能与宿主免疫系统相互作用，在存在辅剂的情况下(灭菌盲肠内容物和硫酸钡)，引发病理生物反应，在腹腔内注射复合物的个体内产生充分形成的腹腔内脓肿。研究在啮齿动物模型中实施，其中类杆菌属(B.fragilis)或其CPC实施腹腔内注射。完整的类杆菌属(B.fragilis)和单独的CPC都能促使与腹内脓血症有关的脓肿形成。

对是否类杆菌属(B.fragilis)的CPC能用来免疫接种受试体抵抗由类杆菌属(B.fragilis)引起的并发感染和脓肿形成进行了研究。这种研究可能仅基于单独的CPC促使脓肿形成的属性，因为“免疫性”和脓肿形成是由间接相关免疫性反应引起的还不了解，所以它决不是可预测的。当皮下服用CPC时，在田鼠模型中发现了对腹腔内CPC-介导脓肿诱导免疫学上的抵抗作用。确定由这种多糖复合物引起的脓肿形成由依赖于T细胞宿主反应介导。

尽管在用类杆菌属(B.fragilis)或CPC攻击后，皮下服用类杆菌属(B.fragilis)或CPC足以使动物免于遭受脓肿形成，但没有如所预计的对其他细菌菌株有免疫性。因此，它们不能用作为由在结肠中常发现的多种生物体引起的脓肿形成的“疫苗”。

CPC包括两种不同的大分子量多糖，称为A和B。每种多糖由不同的寡糖重复单元组成，具有含有游离氨基，羧基和磷酸酯基团的不常见的组分糖。多糖糖A含有四糖重复单元，具有平衡的正电氨基基团和负电羧基基团。多糖B含有六糖重复单元，包括含有游离氨基和负电磷酸盐基团的不常见的磷酸2-氨基乙基酯取代基。半乳糖醛酸残基含有一个额外的负电羧基基团。两条糖链之间的离子相互作用牢固地将多糖A和B结合成大分子量的CPC复合物。对于到目前为止已检测的所有类杆菌属(B.fragilis)菌株，复合物荚膜基元是一个保留特性。

目前，已发现含有具体结构基元的多糖能使动物免于遭受诱导脓肿细菌的攻击。美国专利Nos.5,700,787和5,679,654。较好地，多糖是类杆菌属(B.fragilis)的多糖A的电荷基元特性的重复单元聚合物，基元是一个正电游离氨基组成和从下列组中选取的一个负电组成，包括羧基，磷酸盐，磷酸酯，硫酸盐和磺酸酯。这样的聚合物能诱导“交叉抵抗作用。”即，单一聚合物能产生对由多种细菌引起的脓肿形成的抵抗作用。因此，聚合物可用来诱导对与手术，损伤或使宿主易患脓肿的疾病有关的脓肿形成的抵抗作用。聚合物的药物制备品可结合腹部内手术给受试体服用，或根据易患脓肿的病况的表现给受试体服用。