[发明专利]葡萄糖脱氢酶融合蛋白及其在表达系统中的用途无效
申请号: | 00803879.1 | 申请日: | 2000-02-08 |
公开(公告)号: | CN1340104A | 公开(公告)日: | 2002-03-13 |
发明(设计)人: | W·林克斯维勒;C·布格尔;O·普施克;U·哈夫曼;A·沃尔弗 | 申请(专利权)人: | 默克专利股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/65 | 分类号: | C12N15/65;C12N15/62;C12N9/04;C07K14/00;G01N27/26;C12Q1/32 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 | 代理人: | 周中琦 |
地址: | 德国达*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 葡萄糖 脱氢酶 融合 蛋白 及其 表达 系统 中的 用途 | ||
1.由至少一种第一和第二氨基酸序列所组成的重组融合蛋白,特征在于第一序列具有葡萄糖脱氢酶的生物活性。
2.根据权利要求1的重组融合蛋白,特征在于第二序列是任何重组蛋白/多肽X或代表其部分。
3.根据权利要求2的重组融合蛋白,特征在于它可以另外地具有至少一个适合于检测的其它识别序列(“标记物序列”)。
4.DNA,特征在于它编码根据权利要求1-3的一种融合蛋白。
5.表达载体,特征在于它包括根据权利要求4的一种DNA。
6.表达重组蛋白/多肽的宿主细胞,特征在于它包括根据权利要求5的一种表达载体。
7.葡萄糖脱氢酶在根据权利要求1到3的一种融合蛋白中作为任何重组蛋白/多肽X的检测器蛋白的用途。
8.葡萄糖脱氢酶在作为根据权利要求1到3的一种融合蛋白的成分的一种重组蛋白/多肽X的表达的检测系统中的用途。
9.葡萄糖脱氢酶用于检测蛋白-蛋白相互作用的用途,其中一个伙伴对应于权利要求1到3的重组蛋白/多肽X。
10.葡萄糖脱氢酶在根据权利要求1-3的一种融合蛋白中作为不是根据权利要求1-3的融合蛋白的一种成分,并且能够结合到所说的融合蛋白中的蛋白/多肽X的第二序列的任何第三蛋白/多肽的检测器蛋白的用途。
11.根据权利要求5的一种表达载体在一种重组制备方法中在最优化一种重组蛋白/多肽X的表达中的用途。
12.根据权利要求6的一种宿主细胞在一种重组的制备方法中在最优化一种重组蛋白/多肽X的表达中的用途。
13.通过凝胶电泳(gellectrophoresis)快速检测任何重组蛋白/多肽X的方法,特征在于制备根据权利要求1到4的一种融合蛋白和利用凝胶电泳分级分离,并且通过葡萄糖脱氢酶的酶活性使要在凝胶中被检测的重组蛋白/多肽可见。
14.根据权利要求13的方法,特征在于SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)被用做凝胶电泳方法。
15.根据权利要求13的方法,特征在于基于四氮唑盐的一种颜色反应被用来检测葡萄糖脱氢酶的酶活性。
16.根据权利要求15的方法,特征在于碘代苯基硝基苯基-苯四唑盐(INT)或氮蓝四唑盐(NBT)被用做四氮唑盐。
17.根据权利要求13或16的方法,特征在于葡萄糖脱氢酶的特异性染色之后进行一个普通的蛋白染色。
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