[发明专利]维生素B6的同型酶法测定和H2S检测的改进

权利要求书

1.在生物样品中确定吡哆醛-5’-磷酸盐(PLP)浓度的方法，该方法包括：

a)将所述生物样品或其片断与依赖PLP的同型半胱氨酸酶、蛋氨酸酶或半胱氨酸酶的脱辅基酶形式在有足够底物存在的条件下孵育，以有效的转变成分光光度法可观测到的产物，该产物与样品中PLP的浓度成正比；和

b)用分光光度法检测产物。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述分光光度法检测是通过肉眼进行观测的。

3.如权利要求1所述的方法，其中检测的产物是硫化氢。

4.如权利要求3所述的方法，其中所述硫化氢是通过与N，N-二烷基对亚苯基二胺和一种氧化剂反应进行检测的。

5.如权利要求4所述的方法，其中所述产物是通过荧光检测的。

6.如权利要求3所述的方法，其中所述硫化氢是通过观察所述硫化氢与铅离子的沉淀进行检测的。

7.如权利要求1所述的方法，其中脱辅基酶是同型半胱氨酸酶。

8.在生物样品中确定吡哆醛-5’-磷酸盐(PLP)浓度的方法，该方法包括采用分光光度法测定产物，其中所述产物的获得是通过将所述生物样品或其片断与依赖PLP的同型半胱氨酸酶、蛋氨酸酶或半胱氨酸酶的脱辅基酶形式在有足够底物存在下孵育，以有效转变为分光光度法可观测到的产物，该产物与样品中PLP的浓度成正比。

9.如权利要求8所述的方法，其中所述分光光度法检测是通过肉眼进行观察的。

10.如权利要求8所述的方法，其中检测的产物是硫化氢。

11.如权利要求10所述的方法，其中所述硫化氢是通过与N，N-二烷基对亚苯基二胺和一种氧化剂反应进行检测的。

12.如权利要求11所述的方法，其中所述产物通过荧光进行检测的。

13.如权利要求10所述的方法，其中所述硫化氢是通过观察所述硫化氢与铅离子的沉淀进行检测的。

14.如权利要求8所述的方法，其中脱辅基酶是同型半胱氨酸酶。

15.主要由蛋氨酸酶、同型半胱氨酸酶或半胱氨酸酶的脱辅基酶形式组成的物质的组合物。

16.如权利要求15所述的组合物，其中所述脱辅基酶形式与固体支持物偶联。

17.提高通过硫化氢产生而检测的测定敏感性的方法，该方法包括检测所述硫化氢与N，N-二烷基对亚苯基二胺和氧化剂反应所获得的产物的荧光。

18.如权利要求17所述的方法，其中所述测定是测定同型半胱氨酸。

19.在生物液体中测定PLP的试剂盒，其包括权利要求15的脱辅基酶。

20.权利要求19的试剂盒，进一步包含N，N-二烷基对亚苯基二胺和一种氧化剂。