[发明专利]人同源盒基因LHX4全长cDNA序列

说明书

本发明涉及一种人同源盒基因序列，具体涉及人同源盒基因LHX4的全长cDNA序列。

同源盒基因(homeobox gene)是1983年在瑞士Gehring实验室发现的一类基因，它们因在其基因外显子3′端共同具有一段长180个碱基对、高度保守的同源盒序列而得名，同源盒基因的表达产物是一类重要的转录因子，是发育的主控基因。由这段序列所翻译出的蛋白质更具保守性，并富含碱性氨基酸，因此称为同源盒区(homeodomain)。LIM同源盒基因(LIM homeoboxgene)属于同源盒基因家族，它不仅具有同源盒结构，而且含有两个富含半胱氨酸和组氨酸的LIM结构域。LIM结构域的名称是由LIM家族中三个基因Lin-11(线虫)、Isl-1(鼠)和Mec-3(线虫)名称的首字母缩写而成。LIM同源盒转录因子(LIM homeodomain transcription factor，LIM-HD)是指LIM同源盒基因的蛋白质表达产物，大多表达在神经系统，具有早期特征的的形成及后期调控组织特异性基因的表达等功能，因而这些基因决定脊柱和非脊柱动物发育中组织和细胞特异性分化。

LHX4基因(LIM homeobox gene 4)属于LIM同源盒基因家族。1994年，美国Hung Li等人依据同源盒区最保守的氨基酸序列“KIWFQNRR”设计了一个含有编码同源盒序列羧基端14个氨基酸序列的基因克隆，然后用这段基因序列去筛选小鼠胚胎cDNA文库后得到一个1196bp的cDNA阳性克隆。这个克隆含有一段编码170个氨基酸的翻译区，它的位置从3′poly-A一直延伸到homeobox的5′端，因而它与LHX3有较高的同源性而命名为LHX4(Li Hung，Witte DP，Branford WW et al.Gsh-4 encodes a LIM-typehomeodomain is expressed in the developing central nervous system and isrequired for early postnatal survival.The EMBO J，1994，13：2876-2885)。但由于LHX4基因在机体内的表达量很低，此后国内外一直没有获得小鼠或其他物种LHX4基因的cDNA全长序列。

本发明的目的是提供一种可以在成人中枢神经系统组织中得到表达的人LHX4基因的cDNA全长序列。

本发明的发明人以LHX4 pBluescript质粒(Li H，Witte DP，Branford WWet al.Gsh-4 encodes a LIM-type homeodomain is expressed in the developingcentral nervous system and is required for early postnatal survival.The EMBO J，1994，13：2876-2885对该质粒有详细描述)中小鼠LHX4基因cDNA 3′端部分序列为探针，应用放射性原位杂交技术筛选人脊髓cDNA文库，在数百个阳性克隆中意外地得到一个含有完整的开放性阅读框架(opening reading frame，ORF)、3′端有明显的Poly A结构的阳性克隆。它编码一个含399个氨基酸的蛋白质，与已知小鼠LHX4蛋白质仅有3个不同的氨基酸。该克隆的核酸序列与小鼠LHX4(AF135415)cDNA序列有92％的相似性，具体表示为：