[发明专利]一种新的多肽——人蛋白丝氨酸－苏氨酸磷酸酶14.30和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人蛋白丝氨酸-苏氨酸磷酸酶14.30，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

有许多细胞功能，包括细胞信号，基因表达以及有丝分裂都是由可逆性磷酸化蛋白上的丝氨酸以及苏氨酸残基来调控的。催化这些氨基酸去磷酸化的磷酸酶是这种调节中一个主要的组分。现已发现有四种类型的蛋白丝氨酸/苏氨酸磷酸酶活性(PP1，PP2A，PP2B以及PP2C)，它们可被分成两种结构不同的家族，即PP1/PP2A/PP2B家族以及PP2C家族(Fischer，E.H.and Krebs，E.G.(1990)Biochim.Biophy.Acta，1000，297-301)。

近来有研究发现一种新的人蛋白丝氨酸/苏氨酸磷酸酶，PP5，这种蛋白含有一个C-端磷酸酶催化区域以及一个具有四个34个氨基酸重复的N-端域，四个重复中有三个是串联排列的。磷酸酶区域具有PP1/PP2A/PP2B基因家族所有不同的特征序列模板，但与任何其他已知的成员并不密切相关(同一性不超过40％)。因而PP5与PPT1构成了一个新的亚家族。其中N-端域的重复与四-三肽重复(TPR)特征序列模板相似，后者存在于几种有丝分裂，转录以及RNA剪切所需的蛋白中。PP5能够对蛋白中的丝氨酸残基去磷酸化，并且比PP1对于肿瘤启动子冈田(软海绵)酸更为敏感。PP5在人体所有的组织中表达，它在细胞内主要分布在核内。它类似于其他的核含有TPR蛋白，在RNA生物发生的调控以及有丝分裂中起重要作用(Mao Xiang Chen，Alison E.McPartlin，Linda Brown，Yu HuaChen，Hazel M.Barker and Patricia T.W.Cohen，The EMBO Journal 13(18)，4278-4290，1994)。

本发明新的多肽与人蛋白丝氨酸-苏氨酸磷酸酶在蛋白水平上有92％的同一性和94％的相似性，且具有相似的生物学功能和结构，因而被命名为人蛋白丝氨酸-苏氨酸磷酸酶54.01。该多肽极其激动剂，抑制剂，拮抗剂可用于诊断兼防治与RNA生物发生的调控以及有丝分裂相关的疾病，例如各种癌症等。

由于如上所述人蛋白丝氨酸-苏氨酸磷酸酶14.30蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人蛋白丝氨酸-苏氨酸磷酸酶14.30蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人蛋白丝氨酸-苏氨酸磷酸酶14.30蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人蛋白丝氨酸-苏氨酸磷酸酶14.30以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人蛋白丝氨酸-苏氨酸磷酸酶14.30的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人蛋白丝氨酸-苏氨酸磷酸酶14.30的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人蛋白丝氨酸-苏氨酸磷酸酶14.30的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人蛋白丝氨酸-苏氨酸磷酸酶14.30的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人蛋白丝氨酸-苏氨酸磷酸酶14.30的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人蛋白丝氨酸-苏氨酸磷酸酶14.30异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少93％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中86-478位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1524位的序列。