[发明专利]一种新的多肽——GTP结合蛋白13.86和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——GTP结合蛋白13.86，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

肌肉中的肾上腺素和肝中的胰高血糖素通过级联机制促进糖原的分解作用，它从活化腺苷酸环化酶开始，再把ATP转变为cAMP和无机焦磷酸。许多激素和神经递质能够活化腺苷酸环化酶。细胞外的激素结合转换为细胞内的cAMP生产需要一些膜蛋白的作用，嵌在膜的双分子层中的激素受体结合激动剂后，构象发生变化，使它能去活化GTP结合蛋白。由于GTP不能穿过膜，所以GTP结合位点必须面向细胞的内侧。当GTP被结合后，GTP结合蛋白就刺激腺苷酸环化酶。GTP结合蛋白也有GTPase的活性，这使它能够避免持久处于被活化状态。为了得到最大的GTP结合蛋白活性，经常使用不可水解的GTP类似物鸟苷-5’-(β，γ-亚氨)三磷酸(GppNHp)。

腺苷酸环化酶活性的表现需要二价金属离子的参与，在生理阳离子Mg2+的存在下，酶的催化活性依赖于GTP结合蛋白。受体、GTP结合蛋白和腺苷酸环化酶在膜内是游离扩散的，三者偶联在一起的情况可能很少见。当激素-受体复合物激活GTP结合蛋白去结合GTP时，它对受体有一种相互的抑制效应，即降低受体对激动剂的亲和力。GTP结合蛋白对激素结合的负效应以及对GTP的水解活性，都是为了限制在激素没有呈现饱和浓度时腺苷酸环化酶的活化程度。

GTP结合蛋白在原核生物和真核生物体内普遍存在。Bacillus subtilis中的Obg蛋白是一种重要的GTP结合蛋白，能够水解GTP，Obg蛋白还是调节σ(B)转录因子的应力活化所必不可少的，并且还可能在接触底物后发生自体磷酸化。另外，Rho蛋白家族也属于GTP结合蛋白，GTP结合和GDP结合形式之间的互换使得Rho蛋白成为一种分子开关，调节细胞内的信号通路。

本发明的人的多肽与GTP结合蛋白Obg是GTP结合蛋白，含GTP结合蛋白家族的特征性序列，两者具有相似的生物学功能。本发明的多肽在体内能与GTP结合，水解GTP产生cAMP，促使激素对其的结合，同时，本发明的多肽还可调节转录因子的应力活化。本发明的多肽表达异常通常与一些相关的物质代谢紊乱性疾病、蛋白代谢紊乱性疾病及相关组织的肿瘤及癌症等疾病的发生密切相关，并产生相关的疾病。

由此可见，本发明的GTP结合蛋白的表达异常将产生各种疾病尤其是各种肿瘤、胚胎发育紊乱症、生长发育障碍性疾病、炎症、免疫性疾病。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与GTP结合蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为GTP结合蛋白13.86。

由于如上所述GTP结合蛋白13.86蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的GTP结合蛋白13.86蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新GTP结合蛋白13.86蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——GTP结合蛋白13.86以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码GTP结合蛋白13.86的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码GTP结合蛋白13.86的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产GTP结合蛋白13.86的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——GTP结合蛋白13.86的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——GTP结合蛋白13.86的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与GTP结合蛋白13.86异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；