[发明专利]一种新的多肽——雌激素磺基转移酶13.97和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——雌激素磺基转移酶13.97，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

雌激素磺基转移酶是一种胞内酶，它催化利用3′-磷酸腺苷-5′-磷酰硫酸作为活化的磺酰基供体的雌激素磺基结合作用以及雌激素失活作用。研究发现，在3′-磷酸腺苷-5′-磷酰硫酸作为磺酰基供体存在时，人雌激素磺基转移酶对于雌二醇、孕烯醇酮具有高度的亲和力。另外，人雌激素磺基转移酶亦可结合脱氢异雄甾酮，人雌激素磺基转移酶对于类固醇的结合仅有低的底物特异性。鼠雌激素磺基转移酶功能结构域的突变会导致其磺基转移功能以及3′-磷酸腺苷-5′-磷酰硫酸依赖的雌激素结合能力的减落。(Qian Y，Song WC；1999)。

雌激素磺基转移酶具有由α-螺旋所围绕的中心的五线β折叠结构。在其功能结构域上具有底物或3′-磷酸腺苷-5′-磷酰硫酸结合位点，该位点显示了关键的保守氨基酸残基。雌激素磺基转移酶功能结构域上的谷氨酸突变会使酶的活性减低。(Rana Dajani.，et al.；1999)。

研究发现，雌激素磺基转移酶与激素依赖性肿瘤如乳腺癌、乳腺瘤、子宫内膜瘤，上皮细胞肿瘤以及高甘油三酯血症(HTG)具有密切关系。(Harada N.etal.；1999)(Pasqualini JR，Chetrite GS.，et al.；1999)(Lewis AJ，etal.；1999)

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与雌激素磺基转移酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为雌激素磺基转移酶13.97。

由于如上所述雌激素磺基转移酶13.97蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的雌激素磺基转移酶13.97蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新雌激素磺基转移酶13.97蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——雌激素磺基转移酶13.97以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码雌激素磺基转移酶13.97的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码雌激素磺基转移酶13.97的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产雌激素磺基转移酶13.97的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——雌激素磺基转移酶13.97的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——雌激素磺基转移酶13.97的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与雌激素磺基转移酶13.97异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中919-1302位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1503位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制雌激素磺基转移酶13.97蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。