[发明专利]一种新的多肽——人细胞程序性死亡负调节因子13.64和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人细胞程序性死亡负调节因子13.64，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

细胞程序性死亡是一种普遍存在的现象，发生在淋巴细胞、胸腺细胞、肝细胞、皮肤和胚胎发生细胞等多种依赖于激素的组织中。其是由蛋白酶和一些其它特殊蛋白的主动合成所造成的细胞自杀性死亡，是生物体正常发育的一部分。动物的大多数细胞在发育的一定阶段均会出现正常的自然死亡，其不同于一般的细胞坏死，是相关组织的生长、发育的重要自身调控机制，如在手足发育过程中，程序化细胞死亡导致指(趾)间组织的消失而使指(趾)相互分离；淋巴细胞的程序化死亡是确保免疫系统识别自己和异己成分的一个重要部分；脊髓动物中，70％以上的潜在成神经细胞在神经系统发育的特定阶段死亡等。近年的研究还表明，生物体内一些细胞无法进入程序性死亡，将导致相关组织肿瘤及癌症等恶性疾病的发生。因而，细胞的程序性死亡在各种组织及器官的生长发育过程中军起着重要的调节作用，是生物体内自身代谢调节的一种重要方式。

细胞程序性死亡过程由多种调节蛋白的共同作用来协同完成。对细胞程序性死亡的研究最早是由线虫开始的，在线虫中，共有11种基因参与细胞的程序性死亡过程，主要由ced3、ced4、ced9三个基因控制程序死亡的开始，其中ced3和ced4是细胞死亡所必需的，而ced9基因是细胞程序死亡过程中的负调节因子，这三个基因中的任何一个突变或功能缺失都将导致正常程序性死亡的细胞存活，从而影响一系列相关代谢途径的进行。而其余的多种基因则在死亡细胞的吞噬过程中起作用。近年的研究发现，在哺乳动物及脊髓动物中亦存在着多种不同的基因，在生物体内调控着细胞程序化死亡过程的进行。

1994年，Wang L等人从人中克隆得到了一细胞程序性死亡调节基因Ich-1，该基因与线虫的ced-3基因、哺乳动物的ced-3基因等均有较高的相似性。该基因是脊髓动物细胞程序性死亡过程中的一个重要的正负调节因子，其在生物体内存在着两个不同的转录本----Ich-1L和Ich-1S，其中Ich-1L的过量表达将促进细胞程序死亡的进行，而Ich-1S的过量表达则将抑制细胞的程序性死亡。生物体正是通过这两个转录本的协同作用来正确地调节相关组织的细胞程序死亡过程，这两个转录本的任意一者突变或功能异常都将导致相关组织细胞程序死亡过程的异常，从而引发各种相关的疾病，如免疫系统紊乱性疾病及相关组织肿瘤及癌症等疾病的发生[Wang L，Miura M.et al.，1994，Cell，78：739-750]。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与人细胞程序性死亡负调节因子的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人细胞程序性死亡负调节因子13.64。

由于如上所述人细胞程序性死亡负调节因子13.64蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人细胞程序性死亡负调节因子13.64蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人细胞程序性死亡负调节因子13.64蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人细胞程序性死亡负调节因子13.64以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人细胞程序性死亡负调节因子13.64的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人细胞程序性死亡负调节因子13.64的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人细胞程序性死亡负调节因子13.64的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人细胞程序性死亡负调节因子13.64的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人细胞程序性死亡负调节因子13.64的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人细胞程序性死亡负调节因子13.64异常相关的疾病的方法。