[发明专利]一种新的多肽——信号肽酶I10.78和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——信号肽酶I 10.78，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

信号肽酶(SPases)(也被称为前导肽酶)自分泌蛋白中移去信号肽。现已知有三种Spases：I型(基因lepB)，负责多数的输出前蛋白的加工；II型(基因lsp)，它只加工脂蛋白；III性，参与加工有些蛋白亚基(Dalbey R.E.，von Heijne G.，Trends Biochem.Sci.17：474-478(1992))。

I型Spase是一种膜整合蛋白，它被一或两个N-段跨膜区域锚定于胞质膜上，而蛋白的主要部分伸出至周质间隙。Spase I中有两个残基对它的催化活性极为重要，它们是：丝氨酸和赖氨酸(Black M.T.，J.Bacteriol.175：4957-4961(1993))。SpaseI与酵母线粒体内膜蛋白水解酶亚基1和2(基因IMP1以及基因IMP2)是进化相关的，后者催化移去信号肽，这是自线粒体基质穿过内膜然后进入内膜空间而定向蛋白所需的(Nunnari J.，Fox T.D.，Walter P.，Science 262：1997-2004(1993))。

在真核生物中，信号肽的去除受一种寡聚酶复合物影响，这种复合物至少由五个亚基构成，被称为信号肽复合物(SPC)。SPC位于内质网膜上。哺乳动物SPC的两种成分，即18Kd(SPC18)以及21Kd(SPC21)亚基与酵母SEC11亚基共享序列相同的区域(van Dijl J.M.，de Jong A.，Vehmaanpera J.，Venema G.，Bron S.，EMBO J.11：2819-2828(1992))。这些蛋白具有三种特征序列模板。第一种含有丝氨酸活性位点：[GS]-x-S-M-x-[PS]-[AT]-[LF]，第二种含有赖氨酸活性位点：K-R-[LIVMSTA](2)-G-x-[PG]-G-[DE]-x-[LIVM]-x-[LIVMFY]，第三种位于C-端部分：[LIVMFYW](2)-x(2)-G-D-[NH]-x(3)-[SND]-x(2)-[SG]，它是一个保守的区域，生物学功能未知(Rawlings N.D.，Barrett A.J.，Meth.Enzymol.244：19-61(1994))。

本发明新的多肽与信号肽酶I家族成员在结构与功能上有高度的相似性，且含有上述三种特征序列模板，因而被认为是该家族的新成员，命名为信号肽酶I。该多肽极其激动剂，抑制剂，拮抗剂可用于诊断兼防治与蛋白合成相关的代谢疾病。

由于如上所述信号肽酶I 10.78蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的信号肽酶I 10.78蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新信号肽酶I 10.78蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——信号肽酶I 10.78以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码信号肽酶I 10.78的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码信号肽酶I 10.78的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产信号肽酶I 10.78的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——信号肽酶I 10.78的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——信号肽酶I 10.78的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与信号肽酶I 10.78异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。