[发明专利]一种新的多肽——人NRD转化酶11.77和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人NRD转化酶11.77，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

高等生物体内均存在着一类金属肽酶即N-精氨酸异源多倍体转化酶(NRD转化酶)，该酶是金属肽酶胰岛素酶蛋白家族的成员，其是一种锌离子依赖的肽链内切酶。该酶在生物体内参与多种N末端富含精氨酸残基的肽链的剪切过程，该酶的突变或表达异常将直接影响一些相关组织及细胞的蛋白的表达与作用。

众所周知，在生物体内有大量的蛋白以蛋白前体的形式存在，其在体内的表达受一些特异的信号分泌途径调控。在哺乳动物中即存在着多种不同的蛋白前体转化酶，以参与调控各种相关的蛋白前体的表达与作用，NRD转化酶即是其中的一种。由此可知，该蛋白在生物体内各种信号传导及作用途径中均起着极为重要的作用。

人们已从多种不同的高等生物体内克隆得到了多种不同来源的NRD转化酶，并对这些不同来源的酶的结构及其生物学活性进行了较为详细的分析。1994年，Chesneau等人即从鼠中克隆得到了一NRD转化酶，并发现其在鼠的睾丸组织中高表达，其蛋白序列中含有一信号多肽及一锌指结合结构域---HXXEH[chesneauV.，Pierotti A.R.et al.，1994，J Biol Chem，269：2056-2061]；1997年，Veronique等人又从人中克隆得到了一新的NRD转化酶，该酶蛋白亦在人的心脏、骨骼肌及睾丸等组织中高表达。该蛋白氨基酸序列的N末端亦含有一锌离子结合结构域---HXXEH，该结构域在蛋白与锌离子结合及作用过程中起着重要的调控作用[Veronique Hospital，Annik Prat et al.，1997，Biochem J，327：773-779]。研究发现，NRD转化酶在生物体精母细胞的发育与成熟过程中起着重要的调节作用，其突变或表达异常将导致精母细胞发育异常，即无法形成正常的具有生物学活性的精子，进而影响生物体的生殖与繁衍，即引发各种相关的胚胎发育系统疾病及一些神经系统疾病。

由上可知，NRD转化酶在生物体生殖细胞的发育与成熟过程中起着重要的调控作用，其通常在精母细胞及睾丸组织中高表达，参与调控精子细胞的形态发生及分化或在生物体内调控精子的移动及其作用。该蛋白的突变或表达异常将导致生物体无法形成正常的具有生物学活性的生殖细胞。该酶在生物体内通常与一些胚胎发育紊乱性疾病、生殖系统疾病、不孕症、神经肌肉综合症及相关组织的肿瘤及癌症等疾病的发生密切相关。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与人NRD转化酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人NRD转化酶11.77。

由于如上所述人NRD转化酶11.77蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人NRD转化酶11.77蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人NRD转化酶11.77蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人NRD转化酶11.77以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人NRD转化酶11.77的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人NRD转化酶11.77的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人NRD转化酶11.77的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人NRD转化酶11.77的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人NRD转化酶11.77的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人NRD转化酶11.77异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：