[发明专利]一种新的多肽——人热休克蛋白9.24和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人热休克蛋白9.24，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

蛋白前体在跨膜运送前需要从折叠状态变为解折叠状态，形成松散结构以利于跨膜运送，跨膜后，解折叠状态需重新卷曲折叠为成熟的蛋白质分子。现认为跨膜运送的蛋白质在解折叠和重新折叠过程中都可能有一类被称为“分子伴侣”的分子参与。分子伴侣的绝大部分属于热休克蛋白。分子伴侣有解折叠酶的功能，并且可以利用ATP水解所释放的能量参与蛋白质跨膜运送后的分子重新折叠和组装过程。(细胞生物学  汪  仁等主编  北京师范大学出版社)

在生物体内，热休克蛋白的基本功能还包括，选择性的与畸形的蛋白质及其聚合物结合，利用水解ATP所释放的能量使聚集的蛋白质溶解并进一步折叠成具有正确构象的蛋白质。(细胞生物学  翟中和主编  高等教育出版社pp112)生物体内，对帮助变性或错误折叠蛋白重新折叠形成正常分子，主要是通过热休克蛋白来完成的。(细胞生物学  汪坤仁等主编  北京师范大学出版社)

DnaJ是一个热休克蛋白家族，在包括人的很多生物体内都克隆到了编码DnaJ蛋白的基因。在对大肠杆菌DnaJ蛋白的研究发现，DnaJ和DnaK共同作用起到分子伴侣的功能。此功能的核心是DnaJ与DnaK相互作用，共同刺激ATP酶的活性。实验结果证明，DnaJ的胺基末端的高度保守序列，也称J结构域，在ATP酶的活化、lambda-DNA的复制过程中是充分且必要的。这一结论可推广至真核生物。(J Biol Chem 1994 Feb 18；269(7)：5446-51)

最新的进展显示，已从人的纤维肉瘤cDNA文库中克隆到了编码DnaJ类似蛋白的基因，它编码的蛋白有397个氨基酸残基，有DnaJ所具有的N-末端J结构域，有四重复的Cys-X-X-Cys-X-Gly-X-Gly结构域(这是DnaJ家族特有的结构)。(Biochem Biophys Acta  1993 Jul 18；1174(1)：114-6)

逆转录PCR的结果表明，DnaJ的mRNA在人的各种组织中均有表达，编码DnaJ的基因被定位于人染色体组的15q25位置。(J Hum Genet 1999；44(3)：185-9)DnaJ蛋白除了具有一般的热休克蛋白功能以外，根据研究还发现了很多特殊功能。

遗传学的研究表明，真核生物的DnaJ蛋白可以调节lacZ操纵子调控的激素受体的活性，DnaJ蛋白在激素的信号传导、调控类固醇激素受体活性等过程中有重要作用。(J Biol Chem 1995 May 10；270(10)：5251-7)

除了已公认的DnaA、DnaJB、DnaC等以外，DnaJ和RepA共同形成复合物，与DnaK，GrpE一同在质粒起源的噬菌体P1的体外复制过程中起作用。(Proc NatlAcad Sci U S A 1990 Apr；87(7)：2 690-4)

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与热休克蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人热休克蛋白9.24。

由于如上所述人热休克蛋白9.24蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人热休克蛋白9.24蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人热休克蛋白9.24蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人热休克蛋白9.24以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人热休克蛋白9.24的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人热休克蛋白9.24的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人热休克蛋白9.24的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人热休克蛋白9.24的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人热休克蛋白9.24的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人热休克蛋白9.24异常相关的疾病的方法。