[发明专利]一种新的多肽——人遍在蛋白C端水解酶8.8和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人遍在蛋白C端水解酶8.8，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

哺乳动物支链α酮酸脱氢酶复合物(BCKD)可催化α酮酸的氧化脱羧作用，这种α酮酸来自支链亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸的转氨基作用。支链转酰酶(支链α酮酸脱氢酶复合物的二氢硫辛酸转酰酶，BCKD-E2)形成了线粒体多酶复合物-α酮酸脱氢酶复合物(BCKD)的核心单位(Kim S.et al.，1992)。

以BCKD-E2为代表的转酰酶具有以下结构：

1.人BCKD-E2的硫辛酸-赖氨酸结合区域由10个氨基酸残基Glu-Val-Gln-

Ser-Asp-Lys-Ala-Ser-Val-Thr组成，这一氨基酸残基序列的侧面结合着硫

辛酸，在所有的X-E2(X代表不同种属不同组分)中10个氨基酸残基序

列中特异的Lys与随后第11个氨基酸残基Gly是高度保守的，它们有着

转酰酶反应与活化的位点偶联作用；

2.BCKD-E2的前导序列有Arg残基，在多聚腺苷酸尾之前有三个重复的多聚

腺苷酸信号六碱基顺序ATTAAA；

3.不同种属的二氢硫辛酸转酰酶(E2)均有富含脯氨酸-丙氨酸的螺旋状结

构域，它有使硫辛酸-赖氨酸结合置于延伸的臂结构的作用；

4.E2有硫辛酰胺脱氢酶E3亚基结合区域，这一区域富含赖氨酸、谷氨酸、

谷氨酰胺

5.E2的催化位点在C端，它包含硫辛酰胺脱氢酶E1亚基结合区域

6.硫辛酸-赖氨酸结合区域、E1亚基结合区域/E3亚基结合区域、核内区域被裸露的饺链区域所分离(Kimberly B.et al.，1988；Kim S.et al.，1992)BCKD可催化支链亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸的转氨基作用产生的α酮酸的氧化脱羧作用，BCKD活性的异常会导致支链亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸的代谢异常，并引起相关的疾病。

现已研究发现，槭糖浆尿毒症(MSUD)是由BCKD活性异常所引起，它是一种遗传病，表现为酮酸症、神经性疾病、精神发育迟缓。染色体上E2的多种不同类型突变可引起BCKD活性异常(Canner，D.J et al.，1989)

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与人遍在蛋白C端水解酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人遍在蛋白C端水解酶8.8。

由于如上所述人遍在蛋白C端水解酶8.8蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人遍在蛋白C端水解酶8.8蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人遍在蛋白C端水解酶8.8蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人遍在蛋白C端水解酶8.8以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人遍在蛋白C端水解酶8.8的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人遍在蛋白C端水解酶8.8的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人遍在蛋白C端水解酶8.8的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人遍在蛋白C端水解酶8.8的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人遍在蛋白C端水解酶8.8的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人遍在蛋白C端水解酶8.8异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。