[发明专利]一种新的多肽－人呼吸链NADH脱氢酶30KDa亚单位11.88和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人呼吸链NADH脱氢酶30KDa亚单位11.88，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

呼吸链NADH脱氢酶(也称之为复合物I或NADH-辅酶Q氧化还原酶)是一种多聚酶复合物，存在于线粒体内膜、叶绿体及蓝细菌中。在蓝细菌中，其又被作为一种NADH-质体醌氧化还原酶[Hanns Weiss，Thorsten Friedrich et al.，1991，Eur JBiochem，197：563-576]。该酶复合物由25-30个多聚肽链亚单位组成，其中有15个亚单位存在于膜上，而这15个亚单位中的7个在许多不同的物种中均由线粒体和叶绿体基因组编码。

在该酶复合物的25-30个多聚肽链亚单位中有一类亚单位，其家族成员的分子量为30KDa，该蛋白亚单位家族的成员在哺乳动物体内广泛存在，其在生物体内与脱氢酶复合物中的相关亚单位协同作用，亦参与调控各种呼吸链的反应。其作为电子传递的中间物，负责将电子传递给氧，生成氧离子，与2H⁺结合成H₂O。

众所周知，呼吸链是生物体内电子传递及能量转换的重要方式，而呼吸链反应过程中涉及各种不同酶的作用。这些不同的酶在呼吸链过程中协调作用以促进呼吸代谢过程的完成。其中的任意一种物质突变或表达异常都将导致呼吸链的作用异常。因而，NADH脱氢酶复合物作为呼吸链的重要组成部分亦在此过程中起着重要的调节作用，其表达异常将导致生物体内呼吸链能量代谢的紊乱，从而引发各种相关的代谢紊乱症。

研究发现，NADH脱氢酶30KDa亚单位蛋白家族的成员中存在如下所示的保守的序列片段：E-R-E-X(2)-[DE]-[LIVMF](2)-X(6)-[HK]-X(3)-[KRP]-X-[LIVM]-[LIVMS]；所有该酶亚单位家族的成员均含有以上所述的保守的序列片段。该序列片段可能是酶复合物30KDa亚单位的活性作用中心，其突变将导致亚单位的表达异常，从而影响其在呼吸链中的作用。该蛋白家族的成员的表达异常通常与生物体内各种与呼吸链相关的发育代谢紊乱症、物质代谢紊乱症等疾病的发生相关。

本发明的新的多肽的氨基酸序列中亦含有如上所述的NADH脱氢酶30KDa亚单位蛋白家族的保守的特征性序列片段，其是该蛋白家族的新成员，与已知的该蛋白家族的其他成员具有相似的结构及功能特征。

由于如上所述人呼吸链NADH脱氢酶30KDa亚单位11.88蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人呼吸链NADH脱氢酶30KDa亚单位11.88蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人呼吸链NADH脱氢酶30KDa亚单位11.88蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人呼吸链NADH脱氢酶30KDa亚单位11.88以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人呼吸链NADH脱氢酶30KDa亚单位11.88的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人呼吸链NADH脱氢酶30KDa亚单位11.88的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人呼吸链NADH脱氢酶30KDa亚单位11.88的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人呼吸链NADH脱氢酶30KDa亚单位11.88的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人呼吸链NADH脱氢酶30KDa亚单位11.88的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人呼吸链NADH脱氢酶30KDa亚单位11.88异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；