[发明专利]一种新的多肽——人LepA蛋白12.32和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人LepA蛋白12.32，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

GTP酶是生物体内一类常见的酶，催化相关组织细胞GTP水解反应的进行，是体内核蛋白转运所必需的一类重要的酶。GTP酶在生物体内与GTP酶激活蛋白协同作用，以发挥其正常的催化活性，促使其完成相应的生理学功能。GTP酶激活蛋白在生物体内的定位决定了在何种组织将发生由GTP酶催化的GTP水解反应。由此可知，GTP酶生物在体内与相应的GTP酶激活蛋白协同作用，调控着体内相关蛋白在细胞内的转运。

人们已从酵母、人等多种生物体内克隆得到了各种不同来源的GTP酶，所有这些酶组成了一庞大的蛋白家族，即GTP酶超家族。研究发现，所有该蛋白家族的成员均在生物体内参与调控各种相关的细胞核蛋白的转运过程。在各种不同生物体内，GTP酶均与不同的GTP酶激活蛋白结合，以激活其在体内的催化活性，从而催化GTP水解反应完成，进而调控各种与之相关的细胞核蛋白转运，将蛋白运入细胞核，以作为细胞核的重要组成成分，参与形成正常的细胞核结构。

1996年，Georg等人又从线虫中克隆得到了一LepA蛋白，研究发现，该蛋白与大肠杆菌中的LepA蛋白具有较高的同源性，他们的蛋白序列中均含有四个高度保守的序列基序----G1、G2、G3及G4，且与延伸因子相似的GTP酶非常相似，其亦为GTP酶超家族中的成员，且与该家族中的其它成员具有相似的生物学功能，在体内参与调控相关组织细胞核蛋白的转运。其突变或表达异常通常将导致相关组织细胞内蛋白转运的异常，进而引发各种相关的疾病[GeorgHomuth，Marianne Heinemann et al.，1996，Microbiology，142：1641-1649]。

通过基因芯片的分析发现，在胎脑、原液培养的L02细胞株、0.5％FBS培养液37.C饥饿的L02细胞株、胎肾、直肠癌，胎肝、成人肝、肝癌、胎肺、胎脾、胎心、成人心、成人睾丸、胎胃、成人胃中，本发明的多肽的表达谱与人LepA蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人LepA蛋白12.32。

由于如上所述人LepA蛋白12.32蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人LepA蛋白12.32蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人LepA蛋白12.32蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人LepA蛋白12.32以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人LepA蛋白12.32的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人LepA蛋白12.32的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人LepA蛋白12.32的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人LepA蛋白12.32的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人LepA蛋白12.32的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人LepA蛋白12.32异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中209-547位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-928位的序列。