[发明专利]一种新的多肽——人癌症发生相关蛋白REN4517.38和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人癌症发生相关蛋白REN4517.38，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

人类肿瘤抗原由患者自体同源的细胞毒素T淋巴细胞或抗体识别。用重组cDNA表达的血清分析法(SEREX)分析许多不同的人类肿瘤类型，揭示一系列肿瘤抗原(细胞免疫及体液免疫)，包括在肿瘤中扩增或过度表达的抗原，变异抗原及CT抗原家族成员(它们在肿瘤及正常睾丸细胞中表达)。血清IgG抗体所检测出的6个抗原在69％的患者中都存在，但不存在于正常细胞中。已知的用SEREX法检测出5个不同的相关抗原，其中之一HOM-RCC-3.1.3，是一新的肿瘤结合脱水酶，它在10％的肾癌细胞中过度表达。

1999年，Matthew J Scanlan等人用SEREX法共分离出65种癌症相关抗原基因(NY-REN)，其中29种代表新的转录本，36种编码已知蛋白。NY-REN-9，-10，-19与人类肿瘤有关，NY-REN-9和NY-REN-10分别与(LUCA-15)和21号基因的转录本一致，携带肿瘤抑制基因，定位于3号染色体p21.3区域的微卫星区域D3S3582和D3S1588之间，在小细胞肺癌肿瘤(Killary et al.，1992)及肾癌(Van den Berg et al.，1996)中缺失，REN-19与Peutz-Jeghers综合症及肿瘤基因产物LKBl/STK11功能相同。REN-26由定位在t(9：22)的bcr基因编码，与BCR丝氨酸/苏氨酸激酶基因具相似性。REN-33和REN-65可能编码肿瘤抑制蛋白，REN-33和肿瘤抑制因子SNC6相似，定位于22号染色体q13.1区域的微卫星序列D22S277和D22S279之间，该序列在乳腺癌中缺失，REN-65和鼠HREV 107肿瘤抑制基因同源，它定位于11号染色体q12区的微卫星序列D11S1357和D22913之间。33个基因产物不仅和自体同源的抗体发生交叉反应，还与正常供体反应，表明该33个产物的免疫原性不仅局限于癌症，而12个抗原与5-25％的癌症抗体反应，但不与正常供体反应，肾脏癌症患者具一个以上的这种抗原相关抗体，其中7个抗原与人类肿瘤形成有关。29种新转录本中，REN-6，-7，-21，-23，-28，-34，-36，-37，-43，-45定位于核中，其中REN-21，-23，-34，-43是DNA结合蛋白，具锌指结构，REN-6，-7，-37可能是RNA结合蛋白，REN-5，-22，-25，-58，-62可能和细胞骨架结合，REN-2，-8，-55在信号转导中发挥作用，REN-18，-60与泛激素途径有关，REN-28和-52是转录因子，REN-12和-48是膜结合蛋白，REN-24定位接近于微卫星序列D19S216，该区与子宫癌密切相关。REN-25定位于12号染色体q22区，该区在胰腺肿瘤中缺失。REN转录本在许多组织中都有表达，REN-21是一DNA结合/调节蛋白，它在16种正常组织中皆表达，它的cDNA由1663bp组成，含有1238个bp的开放阅读框，编码412个氨基酸，具7个C2H2的锌指结构域，定位于7号染色体q22.1区的微卫星序列D7S479和D7S550之间[IntJ.Cancer 1999，83：456-464]。

REN转录本与人类免疫相关，它们在许多组织(包括肿瘤和正常细胞)中表达，起防御、免疫、信号转导、DNA结合/调节、RNA结合、膜结合、细胞骨架结合等一系列功能，若异常表达，将引起各种疾病，破坏人类正常生命活动。此外，REN在相关疾病的诊断中有重要作用。

通过基因芯片的分析发现，在胎脑、原液培养的L02细胞株、0.5％FBS培养液37.C饥饿的L02细胞株、胎肾、直肠癌，胎肝、成人肝、肝癌、胎肺、胎脾、胎心、成人心、成人睾丸、胎胃、成人胃中，本发明的多肽的表达谱与人癌症发生相关蛋白REN4 5的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人癌症发生相关蛋白REN4517.38。