[发明专利]一种新的多肽——LIM同源域转录因子结合蛋白12.10和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——LIM同源域转录因子结合蛋白12.10，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

Lhx3是转录因子LIM同源域家族的成员，它是垂体发育过程中必需的因子，参与垂体特异性的荷尔蒙基因的转录。SLB是一种新的基因产物，它选择性地与Lhx3结合，与LIM因子Lhx4密切相关。SLB的cDNA编码一个含有1749氨基酸残基的蛋白质，它的氨基端附近的250个氨基酸中含有七个WD40重复，每个WD40重复单元约含40个氨基酸，一般以色氨酸结尾，后面接一个天冬氨酸。SLB还含有一个推测的核酸定位信号，除此之外不含任何其他已知结构域。

SLB具有组织特异性，SLM的mRNA在睾丸和垂体细胞中具有最高的浓度。SLM特异性的与Lhx3和Lhx4在体外和体内以高亲和力结合，而与其他LIM结构域只有较低的亲和力或没有亲和力。含有LIM作用结构域的SLM片段可阻碍Lhx响应的报告基因的表达。SLB的LIM作用结构域可改变报告基因的活性以及它的组织特异性，与LIM因子的特异性结合，显示出，SLB在调节特定的LIM转录因子的活性中起重要地位。(Paul W.Howard，et.al，The Journal Of BiologicalChemistry，2000，275，18：13336-03342)

本发明的人的基因与LIM同源域转录因子结合蛋白基因Lhx3在蛋白水平上有93％的同一性和99％的相似性。且两者均含有LIM同源域转录因子结合蛋白家族的特征性结构域WD40重复和核酸定位信号。基于以上各点，故认为本发明的新基因为LIM同源域转录因子结合蛋白基因，命名为｛LIM同源域转录因子结合蛋白12.10｝。并以此推断其与Lhx3相似，同为LIM同源域转录因子结合蛋白家族的成员，并具有相似的生物学功能。

命名：LIM同源域转录因子结合蛋白12.10

由于如上所述LIM同源域转录因子结合蛋白12.10蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的LIM同源域转录因子结合蛋白12.10蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新LIM同源域转录因子结合蛋白12.10蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——LIM同源域转录因子结合蛋白12.10以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码LIM同源域转录因子结合蛋白12.10的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码LIM同源域转录因子结合蛋白12.10的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产LIM同源域转录因子结合蛋白12.10的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——LIM同源域转录因子结合蛋白12.10的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——LIM同源域转录因子结合蛋白12.10的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与LIM同源域转录因子结合蛋白12.10异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中965-1297位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1430位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。