[发明专利]一种新的多肽——人Ras相关蛋白17.82和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人Ras相关蛋白17.82，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

一些生长因子与其相应的受体结合后，活化受体本身的酪氨酸蛋白激酶，激酶再磷酸化靶蛋白的酪氨酸残基，再通过一系列的磷酸化级联反应，影响基因的表达。这条通路的特点是不需通过G蛋白，而是通过受体自身的酪氨酸蛋白激酶的激活来完成信号的跨膜传导。已发现的有8种生长因子的受体属于这类信号通路：表皮生长因子受体、血小板生长因子受体、肝细胞生长因子受体、神经生长因子受体、血管内皮生长因子受体、胰岛素生长因子受体、胰岛素受体、巨噬细胞集落刺激因子受体。

关于活化的酪氨酸蛋白激酶受体是如何把信号传到细胞核内调节基因表达，来影响细胞的增殖和分化，目前了解最清楚的是通过Ras来完成的。

Ras蛋白是ras基因的产物，由190个氨基酸组成，分子量为21KD。Ras通过共价键与异戊烯基连接使之锚定在质膜的胞质侧面上。Ras蛋白不是蛋白激酶。当Ras与GTP结合时活化了Ras，而与GDP结合时则钝化了Ras，所以Ras的功能可视为分子开关。当Ras活化以后，位于细胞质中的Raf蛋白趋向到质膜胞内侧并与Ras结合，Ras使Raf活化。Raf是丝/苏氨酸蛋白激酶，它使蛋白上的丝/苏氨酸残基磷酸化。在Raf活化后向下游传递信号的过程中包括了很多丝/苏氨酸残基磷酸化级联反应，其中特别重要的一种是有丝分裂原活化蛋白(MAP)激酶(MAPK)。活化后的MAPK进入细胞核，调节一些基因的转录表达，比如，jun和Elk-1或一些蛋白激酶和其他蛋白质。

从酵母到哺乳动物，Ras蛋白都被证明可以调控肌动蛋白细胞骨架。Ras蛋白家族成员都有富含亮氨酸的重复功能域(LRRs)，gelsolin类似功能域被证明与Ras蛋白和肌动蛋白结合有关。(Biochem Biophys Res Commun 1999 Apr2；257(1)：111-6)

Ras结合蛋白是一类含有Ras结合结构域(Ras-binding domain，RBD)的蛋白，其结构上富含亮氨酸重复功能域(LRRs)，被证明能与Ras蛋白结合而起到调控信号传导的重要作用。

Ras蛋白是GTP结合蛋白超级家族成员之一，具有保守的GTP结合基序，GTP结合基序具有广泛的生物学功能，在生物体内调节着细胞的增殖、控制着信号的转导及各种蛋白在体内的表达。这些蛋白的表达异常将导致组织细胞的异常增殖及蛋白的异常表达，从而引发各种与之相关的疾病，如：各种恶性肿瘤及癌症、各种发育紊乱症、各种免疫系统疾病等。因此，Ras结合蛋白可以通过调控Ras蛋白的表达水平，从而在生物体内有重要的作用，包括影响组织细胞的异常增殖及蛋白的异常表达过程，从而可用可以控制细胞的生长、分裂、死亡、分化形成组织以及各种生命过程，并可以进一步用于诊断和治疗各种与之相关的疾病，如：各种恶性肿瘤及癌症、各种发育紊乱症、各种免疫系统疾病等。

1991年，Morimoto等人又从人中克隆得到了一新的人Ras相关蛋白，该蛋白为G蛋白家族的一个新成员，与已知的各种Ras蛋白具有相似的结构及功能特征，且其蛋白序列的C末端还含有一保守的序列片段：Cys-Cys-Pro。该蛋白在生物体内亦参与调控细胞生长、分裂、增殖、死亡等多种重要的生物学过程[Morimoto B.H.，Chuang C.C.et al.，1991，Genes Dev，5(12B)：2386-2391]。其突变或表达异常通常与体内多种组织肿瘤及癌症、各种发育紊乱性疾病、免疫系统疾病等的发生密切相关。

本发明的新的多肽与已知的人Ras相关蛋白在蛋白水平上具有98％的同一性和100％的相似性，且两者具有相似的结构及功能特征，由此推断其是一种新的人Ras相关蛋白，命名为人Ras相关蛋白17.82。该蛋白在体内参与调控多种重要的细胞代谢过程，其突变或表达异常与体内相关组织的恶性肿瘤及癌症、各种发育紊乱性疾病、免疫系统疾病等的发生密切相关。其还可用于诊断及治疗上述各种疾病。

由于如上所述人Ras相关蛋白17.82蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人Ras相关蛋白17.82蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人Ras相关蛋白17.82蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。