[发明专利]一种新的多肽——含结合蛋白依赖转运系统的蛋白质11.77和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——含结合蛋白依赖转运系统的蛋白质11.77，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

完整嵌入膜蛋白能携带底物经过位移进入细胞膜，在物质(如较大分子量的脂蛋白等)运输方面发挥重要作用。细菌结合蛋白依赖转运系统是一个多组分系统，由周血浆底物结合蛋白、1或2个同源的完整嵌入膜蛋白、1或2个提供活性转运系统能量的外膜ATP结合蛋白组成。

结合蛋白依赖转运系统大多数含有一个保守区域，定位于C末端的80-100个氨基酸残基，它存在于两个跨膜结构域之间的细胞质环。除了保守区域，该蛋白的序列变化很大，可将它们分为7个家族，分别命名为：araH，cysTW，fecCD，hisMQ，livHM，malFG和oppBC。该超家族的共同保守序列为：[LIVMFY]-x(8)-[EQR]-[STAGV]-[STAG]-x(3)-G-[LIVMFYSTAC]-x(5)-[LIVMFYSTA]-x(4)-[LIVMFY]-[PKR]。

MalG对于大肠杆菌K12的麦芽糖转运是必需的，该基因的蛋白产物由296个氨基酸残基组成，分子量约为32188Dal。该蛋白高度疏水，可通过六个疏水片段跨膜而作为一个完整的内在膜蛋白。该蛋白含61％的非极性氨基酸，27％的极性、不带电荷氨基酸及12％带电荷氨基酸，其中约60％为碱性氨基酸。其二级结构研究表明，它具有90％的α螺旋或β折叠，3％的β转角及7％的无规卷曲。N端20个氨基酸带正电荷，而带负电荷残基主要簇集在180号残基之后的20个氨基酸片段里。1985年，ElieDassa等人克隆出一个高度保守的、介于MalG和MalF之间的另一个麦芽糖转运体系的完整内在膜蛋白，它也是结合蛋白依赖性转运系统的内在膜蛋白，定位于羧基末端约90个残基处，在大肠杆菌内参与麦芽糖的运输过程。[EMBO，1985，4(9)：2287-2293]

本发明的蛋白质含结合蛋白依赖转运系统结构域，具有上述相似的结构，并且具有一致的保守序列，因而认为它是一种新的含结合蛋白依赖转运系统结构域的蛋白质，与上述蛋白质具类似的生物学功能。若发生异常，会影响物质的正常转运，破坏细胞代谢等功能，引起肿瘤等各种疾病。此外，其在相关疾病的诊断和治疗中也有一定作用。

由于如上所述含结合蛋白依赖转运系统的蛋白质11.77蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的含结合蛋白依赖转运系统的蛋白质11.77蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新含结合蛋白依赖转运系统的蛋白质11.77蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——含结合蛋白依赖转运系统的蛋白质11.77以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码含结合蛋白依赖转运系统的蛋白质11.77的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码含结合蛋白依赖转运系统的蛋白质11.77的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产含结合蛋白依赖转运系统的蛋白质11.77的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——含结合蛋白依赖转运系统的蛋白质11.77的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——含结合蛋白依赖转运系统的蛋白质11.77的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与含结合蛋白依赖转运系统的蛋白质11.77异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。