[发明专利]一种新的多肽——蛋白激酶C47.52和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——蛋白激酶C47.52，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

蛋白质磷酸化是真核生物细胞调控中一个基本调控机制，同时也是最普通的蛋白质修饰方式。例如，细胞分裂，细胞新陈代谢，细胞粘连和细胞迁移，细胞间通讯以及信号传导等细胞活动都出现了蛋白质磷酸化。为了完成这些功能，人类编码基因中有2％-4％的基因编码大约2000种不同的激酶。(Hunter，1996)

蛋白激酶C(PKC)是一种常见的激酶。它广泛的存在于哺乳动物中，在未受到刺激的细胞中，PKC主要分布在细胞溶质中。PKC可以增强特殊记忆的转录。目前已知至少通过两条通路：一是PKC活化一条蛋白激酶的级联反应，磷酸化与DNA基因调节序列结合的基因调节蛋白；二是PKC磷酸化抑制蛋白，使细胞质中的基因调节蛋白从抑制状态下解脱，才能进入细胞核，刺激基因转录。

PKC蛋白家族有至少8个成员。在调节细胞的分化，生长和分泌的广泛的细胞生理过程中起重要作用。PKCι是一类在胰岛素分泌细胞系RINm5F中发现的PKC蛋白。RINm5F可以被伴随营养刺激的胰岛素释放发生的脂类代谢的改变所激活。PKCι与PKCζ的序列有72％的同源性，在催化区域有84％的同源性。相比较而言，PKCι与PKC蛋白家族的其他成员序列的同源性偏低，即使在最保守的催化区域也不会超过53％。PKCι与PKCζ的相似性包括一个高度保守的假底物序列，缺乏钙离子结合区域，只包含一个富含半胱氨酸的锌指蛋白相似结构域。

PKCι蛋白主要表达于肺和脑，低表达于各种组织包括胰岛。研究表明，PKCι不可能被来源于磷酸肌醇水解作用的二酰甘油激活，但可能是营养刺激胰岛素分泌产生的脂类激活的靶蛋白。

综上所述，PKCι是一种蛋白激酶C家族的新成员，可能在营养物质的代谢中起到调控作用。【J Biol Chem 1993 Nov 15；268(32)：24296-302】

另外，PKC参与一些由胞外刺激如激素、神经传递素、生长因子等触发的信号传递系统。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌中，本发明的多肽的表达谱与蛋白激酶C的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为蛋白激酶C47.52。

由于如上所述蛋白激酶C47.52蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的蛋白激酶C47.52蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新蛋白激酶C47.52蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——蛋白激酶C47.52以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码蛋白激酶C47.52的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码蛋白激酶C47.52的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产蛋白激酶C47.52的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——蛋白激酶C47.52的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——蛋白激酶C47.52的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与蛋白激酶C47.52异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。