[发明专利]一种新的多肽——癌症发生相关蛋白REN66.44和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——癌症发生相关蛋白REN66.44，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

人类肿瘤抗原由患者自体同源的细胞毒素T淋巴细胞或抗体识别。用重组cDNA表达的血清分析法(SEREX)分析许多不同的人类肿瘤类型，揭示一系列肿瘤抗原(细胞免疫及体液免疫)，包括在肿瘤中扩增或过度表达的抗原，变异抗原及CT抗原家族成员(它们在肿瘤及正常睾丸细胞中表达)。血清IgG抗体所检测出的6个抗原在69％的患者中都存在，但不存在于正常细胞中。已知的用SEREX法检测出5个不同的相关抗原，其中之一HOM-RCC-3.1.3，是一新的肿瘤结合脱水酶，它在10％的肾癌细胞中过度表达。

1999年，Matthew J Scanlan等人用SEREX法共分离出65种癌症相关抗原基因(NY-REN)，其中29种代表新的转录本，36种编码已知蛋白。NY-REN-9，-10，-19与人类肿瘤有关，NY-REN-9和NY-REN-10分别与(LUCA-15)和21号基因的转录本一致，携带肿瘤抑制基因，定位于3号染色体p21.3区域的微卫星区域D3S3582和D3S1588之间，在小细胞肺癌肿瘤(Killary et al.，1992)及肾癌(Van den Berg et al.，1996)中缺失，REN-19与Peutz-Jeghers综合症及肿瘤基因产物LKB1/STK11功能相同。REN-26由定位在t(9∶22)的bcr基因编码，与BCR丝氨酸/苏氨酸激酶基因具相似性。REN-33和REN-65可能编码肿瘤抑制蛋白，REN-33和肿瘤抑制因子SNC6相似，定位于22号染色体q13.1区域的微卫星序列D22S277和D22S279之间，该序列在乳腺癌中缺失，REN-65和鼠HREV 107肿瘤抑制基因同源，它定位于11号染色体q12区的微卫星序列D11S1357和D22913之间。33个基因产物不仅和自体同源的抗体发生交叉反应，还与正常供体反应，表明该33个产物的免疫原性不仅局限于癌症，而12个抗原与5-25％的癌症抗体反应，但不与正常供体反应，肾脏癌症患者具一个以上的这种抗原相关抗体，其中7个抗原与人类肿瘤形成有关。29种新转录本中，REN-6，-7，-21，-23，-28，-34，-36，-37，-43，-45定位于核中，其中REN-21，-23，-34，-43是DNA结合蛋白，具锌指结构，REN-6，-7，-37可能是RNA结合蛋白，REN-5，-22，-25，-58，-62可能和细胞骨架结合，REN-2，-8，-55在信号转导中发挥作用，REN-18，-60与泛激素途径有关，REN-28和-52是转录因子，REN-12和-48是膜结合蛋白，REN-24定位接近于微卫星序列D19S216，该区与子宫癌密切相关。REN-25定位于12号染色体q22区，该区在胰腺肿瘤中缺失。REN转录本在许多组织中都有表达，REN-21是一DNA结合/调节蛋白，它在16种正常组织中皆表达，它的cDNA由1663bp组成，含有1238个bp的开放阅读框，编码412个氨基酸，具7个C2H2的锌指结构域，定位于7号染色体q22.1区的微卫星序列D7S479和D7S550之间。[IntJ.Cancer 1999，83：456-464]，

REN转录本与人类免疫相关，它们在许多组织(包括肿瘤和正常细胞)中表达，起防御、免疫、信号转导、DNA结合/调节、RNA结合、膜结合、细胞骨架结合等一系列功能，若异常表达，将引起各种疾病，破坏人类正常生命活动。此外，REN在相关疾病的诊断中有重要作用。

我们所发现的新基因与上述REN基因结构类似，它们的相似性及同源性均为92％，且具有类似的DNA结构特征，其蛋白产物也有相似功能，由此认为我们的发现是REN基因，命名为癌症发生相关蛋白REN66.44。

由于如上所述癌症发生相关蛋白REN66.44蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的癌症发生相关蛋白REN66.44蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新癌症发生相关蛋白REN66.44蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——癌症发生相关蛋白REN66.44以及其片段、类似物和衍生物。