[发明专利]一种新的多肽——Alu因子相关的p97蛋白32.34和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——Alu因子相关的p97蛋白32.34，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

在哺乳动物细胞中，广泛分布着长的和短的重复出现的DNA因子：SINE和LINE，有一些拷贝作为转座因子能够在基因组中移动。Alu家族是SINE的典型代表，每个基因组中存在接近106个拷贝，在人类基因组中占了超过5％的比例(Rinehart，F.P.，Ritch，T.G.，et al.，1981)。在有些情况下，这些重复序列插入到普通基因组中可能引起遗传性疾病(Wallace，M.R.，Anderson，L.B.et al.，1991)或导致癌症的发生(Miki，Y.，Nishisho，I.et al.，1992)更有甚者，还发现有重复序列在一部分蛋白中表达(Makalowski，W.，Mitchell，G.A.，andLabuda，D.，1994)，并且在某些癌科细胞系中也有存在(Hohjoh，H.，and Singer，M.F.，1996)。

目前，在人类主要基因编码序列中，已经找到了Alu因子的完整序列(Margalit，H.，Nadir，E.，and Ben-Sas son，S.A.，1994)，在牛基因组中也找到了一种类似的Alu因子相关蛋白，称为p97蛋白。牛的p97cDNA中间含有840个碱基，其编码序列同源于Alu类似是双聚驱动家族(BDDF)的部分蛋白成员。该蛋白的C末端还包含一对分子外重复子，由40个高度亲水的氨基酸共同组成。人的p97cDNA也已经克隆得到，对其进行序列分析发现，它已经丧失了840碱基的重复序列以及其中一个分子外重复子，但是保存了除此以外的其它保守序列和一些特征性的结构序列。

组织表达研究发现，P97蛋白能够在脑中大量表达，在肝和肺中表达水平适中，而在心脏中的表达水平非常低。P97蛋白在哺乳动物中是较为保守的(其中牛的该蛋白中多了一个插入重复序列)，而在哺乳动物以外的其他种类生物中没有存在。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌中，本发明的多肽的表达谱与Alu因子相关的p97蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为Alu因子相关的p97蛋白32.34。

由于如上所述Alu因子相关的p97蛋白32.34蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的Alu因子相关的p97蛋白32.34蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新Alu因子相关的p97蛋白32.34蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——Alu因子相关的p97蛋白32.34以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码Alu因子相关的p97蛋白32.34的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码Alu因子相关的p97蛋白32.34的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产Alu因子相关的p97蛋白32.34的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——Alu因子相关的p97蛋白32.34的抗体。  

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——Alu因子相关的p97蛋白32.34的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与Alu因子相关的p97蛋白32.34异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；