[发明专利]一种新的多肽——人蛋白合成起始因子10.12和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人蛋白合成起始因子10.12，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

是生物体蛋白质合成的最为重要的步骤，在所有蛋白质合成系统中，合成的起始都需要各种分离的核糖体亚基协同完成。在蛋白质链的合成中要求两种亚基一起作用，在原核及真核生物体内均存在多种蛋白合成起始因子，这些不同的起始因子与体内的一些相关的能量物质及RNA等物质结合以形成相应的蛋白合成起始复合物，以介导体内遗传物质正常的起始翻译为相应的蛋白产物。在真核生物中，蛋白起始复合物的形成过程是：GTP首先与eIF2结合，这一结合增加了eIF2与起始tRNA的亲和力，然后三者便结合成一个三元复合物。三元复合物直接与40S亚基结合，这一过程不需mRNA的存在。40S亚基-三元复合物在eIF3的存在下再与mRNA结合。在此过程中，水解1分子的ATP以提供能量。这样即形成了完整的具有生物学活性的蛋白翻译起始复合物，复合物沿mRNA向起始密码子AUG移动以便形成80S核糖体。当具有翻译活性的80S核糖体形成后，eIF2及eIF3则从复合物中释放出来，核糖体上的P位和A位都处于正确的姿态，以促使蛋白合成过程的顺利进行。

由上可知，蛋白合成起始因子在起始复合物的形成过程中起着极为重要的调控作用。人们已从兔及人等多种生物体内克隆得到了多个蛋白合成起始因子，并对这些蛋白的结构及生物学功能进行了详细的研究。研究发现，蛋白合成起始因子在蛋白与RNA的作用过程中可能起着较为重要的作用，这些蛋白的氨基酸序列中均含有GTP结合位点、锌指蛋白结构域及一高度可变的N末端区域。其中GTP结合位点是蛋白与GTP结合，促进GTP与GDP相互转变为蛋白合成提供所需能量的重要作用位点；而锌指蛋白结构域及N末端高度可变区域则在蛋白与RNA的相互作用过程中起着重要的调节作用。这些蛋白的突变或表达异常将导致体内蛋白合成起始复合物的合成异常，进而影响相关的蛋白的合成，进而引发各种相关的发育及代谢紊乱性疾病[Pathak V.K.，Nieksen P.J.et al.，1988，Cell，54：633-639]。

1996年，MURPHY等人从人中克隆得到了一新的蛋白合成起始因子，该蛋白的氨基酸序列中亦含有一GTP结合位点、一锌指蛋白结构域及一高度可变的N末端区域，该蛋白具有显著的ATP及tRNA结合活性，其在生物体内参与调控蛋白合成起始复合物的形成，其突变或表达异常将直接导致体内相关组织蛋白合成的异常，因而引发各种相关的疾病。

由上可知，蛋白合成起始因子在蛋白合成起始复合物的形成过程中起着重要的调控作用。其突变或表达异常将影响蛋白在体内的作用活性，从而直接影响蛋白合成起始复合物的形成，进而影响与之相关的蛋白在体内的合成及作用。该蛋白在生物体内通常与各种相关的发育及代谢紊乱性疾病、相关组织及器官的肿瘤及癌症等疾病的发生密切相关。其还可用于诊断及治疗上述各种相关的疾病。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人蛋白合成起始因子的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人蛋白合成起始因子10.12。

由于如上所述人蛋白合成起始因子10.12蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人蛋白合成起始因子10.12蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人蛋白合成起始因子10.12蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人蛋白合成起始因子10.12以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人蛋白合成起始因子10.12的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人蛋白合成起始因子10.12的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。