[发明专利]一种新的多肽——脱氧胞苷酸脱氨酶10.12和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——脱氧胞苷酸脱氨酶10.12，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

酶催化dCMP脱氨基变为dUMP，从而为胸腺嘧啶的合成提供核苷酸底物。位于细胞内脱氧核糖核苷酸代谢结合点的脱氨酶活性控制取决于dCTP转变为dTTP的速率，因为该酶是一个异构酶，能被dCTP激活被dTTP抑制[Maley，F.，and Maley，G.F.1972.Curr.Top.Cell.Regul.5，177-228]。

实验表明dCMP脱氨酶在DNA复制中非常重要。(1)在快速分裂组织(鸡和小鼠胚胎，再生肝脏和小鼠的肝细胞瘤)中dCMP脱氨酶活性增加；(2)HeLa细胞dCMP脱氨酶活性在细胞分裂的S晚期最高，而在接下来的G2期骤然下降(3)在哺乳动物细胞中由于dCMP脱氨酶的激活而使四种脱氧核糖核苷酸的含量失衡，dTTP减少dCTP增多，从而导致变异的增多[Weinberg，G.，Ullman，B.，andMartin，D.W.，Jr.1981.Proc.Natl.Acad.Sci.U.

                       S.A.78.2447-2451]。

人的dCMP脱氨酶mRNA包含一个异常的长的3’非翻译区铁传递蛋白受体mRNA也包含一个异常长的3’非翻译区，该区域可能参与对mRNA稳定性的调节[Mullner，E.W.and Kuhn，L.C.1988.Cell53，815-825]。在该酶的催化位点存在一个锌原子，在另一个位点的3个组氨酸和1个半胱氨酸之间还普遍存在一个锌指结构域[Moore，J.T.，Silversmit，R.E.，Male Y，F.1993.J.Biol.Chem.268，2288-2291]。

dCMP脱氨酶在DNA复制中的重要性在于它能为胸苷酸合成酶提供dUMP，并可能是化学疗法药物的靶蛋白[Bebenek，K.，Roberts，J.D.，andKunkel，T.A.1992.J.Biol.Chem.267，3589-3596]，因为在各种疾病不同状态下的血清中都发现了dCMP脱氨酶水平的提高，在疾病的早期诊断方面有重要的意义[Miller，R.L.，andRessler，N.1969.Clin.Chim.Acta26，405-412]。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与脱氧胞苷酸脱氨酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为脱氧胞苷酸脱氨酶10.12。由于如上所述脱氧胞苷酸脱氨酶10.12蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的脱氧胞苷酸脱氨酶10.12蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新脱氧胞苷酸脱氨酶10.12蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——脱氧胞苷酸脱氨酶10.12以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码脱氧胞苷酸脱氨酶10.12的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码脱氧胞苷酸脱氨酶10.12的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产脱氧胞苷酸脱氨酶10.12的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——脱氧胞苷酸脱氨酶10.12的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——脱氧胞苷酸脱氨酶10.12的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与脱氧胞苷酸脱氨酶10.12异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。