[发明专利]一种新的多肽——人整合蛋白胞质域相关蛋白(ICAP－1alpha)26.51和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人整合蛋白胞质域相关蛋白(ICAP-1 alpha)26.51，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

粘着受体家族，它使得细胞与胞外基质或特异性细胞表面对应受体相连。每个亚基由一个大的参与识别配体的胞外域，一个跨膜域以及一个短的胞质域构成。在粘着细胞中，配体结合诱导整合蛋白补充至粘着斑，在粘着斑上，肌动蛋白细胞骨架聚合于胞外基质接触位点。研究表明整合蛋白依赖的细胞粘着能够通过直接亲和调节整合蛋白或通过聚合整合蛋白来调控，后者需要细胞骨架的重排。整合蛋白是作为胞外信号的膜受体作用的，并参与激活胞质信号的级联放大反应，由整合蛋白介导的细胞增殖的依赖，防止细胞凋亡，细胞分化以及细胞基质上的作用，这些都说明这种粘着依赖的细胞信号的重要性(Burridge，K.，andM.Chrzanowska-Wodnicka.1996.Focal adhesions，contractility，andsignaling.Annu.Rev.Cell Dev.Biol.12：463-519)。

整合蛋白的胞质域对于细胞粘连是极为重要的。近来发现的一种新基因，ICAP-1(整合蛋白胞质域-相关蛋白-1)，它与beta1整合蛋白胞质域连接。ICAP-1与beta1整合蛋白间的作用是高度特异的，它们的作用需要一个保守且功能上重要的NPXY特征序列模板，该序列存在于beta1整合蛋白胞质域的COOH-端区域。NPXY特征序列模板的天冬酰胺以及酪氨酸和位于N-端的缬氨酸残基对于ICAP-1的结合是极为重要的。ICAP-1的两种形式，，ICAP-1 alpha以及ICAP-1 beta衍生自不同剪切的mRNA，在多数细胞中表达。ICAP-1 alpha是一种磷蛋白，它的磷酸化是由细胞机制作用调控的，这说明ICAP-1在细胞整合蛋白依赖的细胞粘着中起重要作用。倘若ICAP-1 alpha异常表达会导致细胞粘着以及激活胞质信号的级联放大反应的异常，从而引发一系列与之有关的癌症等疾病(Chang，D.D.，Wong，C.，Smith，H.and Liu，J.，J.Cell Biol.138(5)，1149-1157(1997))。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人整合蛋白胞质域相关蛋白(ICAP-1 alpha)的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人整合蛋白胞质域相关蛋白(ICAP-1 alpha)26.51。

由于如上所述人整合蛋白胞质域相关蛋白(ICAP-1 alpha)26.51蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人整合蛋白胞质域相关蛋白(ICAP-1 alpha)26.51蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人整合蛋白胞质域相关蛋白(ICAP-1 alpha)26.51蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人整合蛋白胞质域相关蛋白(ICAP-1 alpha)26.51以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人整合蛋白胞质域相关蛋白(ICAP-1alpha)26.51的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人整合蛋白胞质域相关蛋白(ICAP-1alpha)26.51的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人整合蛋白胞质域相关蛋白(ICAP-1alpha)26.51的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人整合蛋白胞质域相关蛋白(ICAP-1 alpha)26.51的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人整合蛋白胞质域相关蛋白(ICAP-1 alpha)26.51的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。