[发明专利]一种新的多肽——人神经纤维瘤扩增蛋白9.24和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人神经纤维瘤扩增蛋白9.24，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

编码的转录调节蛋白在真核细胞功能的许多方面起作用，例如细胞周期调节，分化和细胞凋亡等等。另外，c-，N-，L-myc家族成员的突变会导致各种肿瘤的发生。这些突变导致myc表达的下调，而myc的表达在正常情况下是由转录和转录后调控共同控制的。【Biochim.Biophys.Acta 1072，103(1991)】一般来说，myc家族基因在胚胎和成年组织的增殖细胞中表达。N-myc删除的小鼠在胚胎时期的器官发育时期就死亡。【Genes Dev.6，2235(1993)】

许多证据表明N-myc基因的扩增与恶性肿瘤的生长有关。但是，这一基因本身并不是N-myc扩增导致的肿瘤的唯一决定因素。在神经纤维瘤中还有一些基因与N-myc共同扩增，应该与神经纤维瘤的发生有关。其中一个是神经纤维瘤扩增蛋白(neuroblastoma amplified gene，NAG)。它在染色体上的位置接近N-myc的位置2p24。它在5/8N-myc扩增的神经纤维瘤细胞系和9/13N-myc扩增的肿瘤中都扩增了。其开放读框编码一个1353个氨基酸残基的蛋白。在线虫中也可以找到NAG的人神经纤维瘤扩增蛋白，而其广泛的表达表明其在细胞中的作用是相当基本的。NAG的扩增和超表达是形成神经纤维瘤的原因之一。【Oncogene 1999Jan 7；18(1)：233-8】

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv 304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人神经纤维瘤扩增蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人神经纤维瘤扩增蛋白9.24。

由于如上所述人神经纤维瘤扩增蛋白9.24蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人神经纤维瘤扩增蛋白9.24蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人神经纤维瘤扩增蛋白9.24蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人神经纤维瘤扩增蛋白9.24以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人神经纤维瘤扩增蛋白9.24的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人神经纤维瘤扩增蛋白9.24的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人神经纤维瘤扩增蛋白9.24的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人神经纤维瘤扩增蛋白9.24的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人神经纤维瘤扩增蛋白9.24的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人神经纤维瘤扩增蛋白9.24异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中846-1100位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-2843位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。