[发明专利]一种新的多肽——人肝素结合生长因子受体K－ram9.13和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人肝素结合生长因子受体K-ram9.13，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

是一个很大的蛋白家族，其成员在生物体内分布非常广泛，如酸性及碱性FGFs、HST1、HST2/FGF6、INT-2、FGF5及角化细胞生长因子等均为该蛋白家族的成员。该蛋白家族的成员在生物体内参与调控多种重要的生物学代谢过程，其在体内与其相应的受体蛋白协同作用，以调控相关组织的正常生长与发育。该蛋白家族成员或其受体蛋白的突变或表达异常将导致体内相关组织及细胞的生长或发育异常，其通常与体内相关组织的肿瘤及癌症等恶性疾病的发生密切相关。

1990年，Yutaka等人又从人中克隆得到了一新的人肝素结合生长因子受体蛋白K-ram。该蛋白与受体酪氨酸激酶非常相似，其蛋白序列中含有一潜在的糖基化位点、一跨膜区域及一潜在的ATP结合位点。这些蛋白特殊位点均是蛋白发挥正常生理学活性的重要活性中心。在该蛋白氨基酸序列中还含有一免疫球蛋白相似的结构域，该结构域是蛋白识别相应的生长因子，并与之结合，协同作用的重要作用位点。该位点的突变或表达异常将导致体内相关生长因子的作用异常，进而影响体内相关代谢途径的异常，即引发各种相关的疾病[Yutaka Hattori，Hiroki Odagiri et al.，1990，Proc Natl Acad Sci USA，87：5983-5987]。

由上可知，肝素结合生长因子及其受体蛋白K-ram均在生物体相关组织的发育及代谢过程中起着极为重要的调控作用。两者在多种组织中协同作用，以调控相关组织的发育及生长。这两种蛋白的突变或表达异常将导致体内相关组织的发育及生长异常，进而引发各种相关的疾病。研究发现，肝素结合生长因子受体K-ram在体内通过与肝素结合生长因子协同作用，以调控相关组织的生长。该蛋白在体内通常与相关组织的肿瘤及癌症等恶性疾病，尤其是胃癌及肺癌等的发生密切相关。其还可用于诊断及治疗上述各种疾病。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人肝素结合生长因子受体K-ram的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人肝素结合生长因子受体K-ram9.13。

由于如上所述人肝素结合生长因子受体K-ram9.13蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人肝素结合生长因子受体K-ram9.13蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人肝素结合生长因子受体K-ram9.13蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人肝素结合生长因子受体K-ram9.13以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人肝素结合生长因子受体K-ram9.13的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人肝素结合生长因子受体K-ram9.13的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人肝素结合生长因子受体K-ram9.13的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人肝素结合生长因子受体K-ram9.13的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人肝素结合生长因子受体K-ram9.13的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人肝素结合生长因子受体K-ram9.13异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：