[发明专利]一种新的多肽——人β－1,4半乳糖苷转运酶13.2和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人β-1，4半乳糖苷转运酶13.2，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

酶是一种II型膜结合糖蛋白，在脊髓动物体内分布非常广泛。这些酶在生物体内构成了一很大的蛋白家族，即β-1，4半乳糖苷转运酶蛋白家族。该酶家族的成员在生物体内将半乳糖转运至N-乙酰葡糖胺残基，以形成β4-N-乙酰葡糖胺或多聚N-乙酰葡糖胺。而β4-N-乙酰葡糖胺或多聚N-乙酰葡糖胺是组成糖脂、糖蛋白及蛋白多糖的基本结构单位，其突变或表达异常将影响上述蛋白的组成及其在体内的作用活性。在哺乳动物中，β-1，4半乳糖苷转运酶具有各种组织特异的生物合成活性，其在乳腺分泌、乳糖合成过程中起重要的调控作用。

人们已从多种不同的生物体内克隆得到了多种不同来源的β-1，4半乳糖苷转运酶，并对这些蛋白的结构及功能进行了研究。1996年，Bhanu等人又从人中克隆得到了一新的β-1，4半乳糖苷转运酶，该酶亦与已知的半乳糖苷转运酶相似，在生物体内催化相关组织β4-N-乙酰葡糖胺及乳糖的合成。该酶与已知的多种β-1，4半乳糖苷转运酶具有相似的结构特征，其在生物体内作为一种上游调控因子，调控着体内乳糖的生物合成。研究发现，该酶在生物体的心脏、肌肉、胰腺及脑等多种组织中均有表达，而在脑中的表达量明显高于其它组织。该蛋白的突变或表达异常将导致体内相关组织乳糖合成的异常，进而影响一系列相关的细胞内信号途径及糖蛋白代谢途径的异常，即引发各种相关的疾病[Bhanu Rajput，Namcy L.Shaper et al.，1996，J Biol Chem，271(9)：5131-5142]。

由上可知，β-1，4半乳糖苷转运酶在生物体乳糖合成过程中起着重要的调控作用，其在体内催化相关组织乳糖及多种糖蛋白的合成过程。该蛋白的突变或表达异常将导致体内相关组织、细胞信号途径及代谢途径异常，进而引发各种相关的代谢紊乱性疾病。该蛋白在体内通常与多种相关的糖蛋白代谢紊乱性疾病的发生密切相关。其还可用于诊断及治疗上述各种疾病。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人β-1，4半乳糖苷转运酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人β-1，4半乳糖苷转运酶13.2。

由于如上所述人β-1，4半乳糖苷转运酶13.2蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人β-1，4半乳糖苷转运酶13.2蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人β-1，4半乳糖苷转运酶13.2蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人β-1，4半乳糖苷转运酶13.2以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人β-1，4半乳糖苷转运酶13.2的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人β-1，4半乳糖苷转运酶13.2的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人β-1，4半乳糖苷转运酶13.2的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人β-1，4半乳糖苷转运酶13.2的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人β-1，4半乳糖苷转运酶13.2的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人β-1，4半乳糖苷转运酶13.2异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：