[发明专利]一种新的多肽——CAK1抗原9.02和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——CAK1抗原9.02，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

1抗体是鼠免疫球蛋白IgG1k单克隆抗体表达的产物，存在于鼠的多种肿瘤及癌细胞如卵巢细胞癌等细胞中。该抗体在生物体内识别正常间质细胞中相关的分化抗原，其亦在人表皮卵巢细胞癌、多种组织的鳞状细胞癌及各种恶性简直细胞瘤等细胞中识别相关的抗原蛋白。由此可知，MAb K1抗体在生物体相关肿瘤及癌症的发生及生长过程中起着极为重要的调控作用，其对体内相应的抗原蛋白做出相应的反应，以控制相关疾病的发生。

MAb K1抗体识别的抗原CAK1是一种细胞表面糖蛋白，其通过蛋白尾端的糖基-磷脂酰肌醇位点结合于细胞膜上。研究发现，该蛋白在动物肿瘤细胞的成长过程中表达量明显增加。1994年，Kai等人又从人中克隆得到了一新的CAK1蛋白，并对该蛋白的结构及功能进行了研究。该蛋白亦在生物体相关的肿瘤细胞的生长过程中高表达。该蛋白与已知的各种CAK蛋白相似，其氨基酸序列中亦含有一典型的一致性序列片段及三个潜在的糖基化位点。其中糖基化位点可能是抗原蛋白糖基化，并促进体内形成相应抗体的重要活性位点。该蛋白在生物体肿瘤发生及生长过程中表达，以刺激体内形成相应的抗体抑制相关细胞的异常增殖。该蛋白的突变或表达异常，将导致相关细胞的异常增殖，通常与体内相关肿瘤及癌症的发生及生长密切相关[Kai Chang，Ira Pastan et al.，1994，Int JCancer，57：90-97]。

由上可知，CAK1作为一种细胞表面糖蛋白，在生物体相关肿瘤及癌症的发生及生长过程中起重要的调控作用。该抗原蛋白在肿瘤发生时高表达，以刺激体内产生相应的抗体。该蛋白在多种组织的鳞状细胞癌、恶性间质细胞瘤及卵巢细胞癌等细胞中高表达，其突变或表达异常将导致体内相关免疫反应的异常。该蛋白在生物体内通常与各种鳞状细胞癌、恶性间质瘤、卵巢癌等疾病的发生密切相关。该蛋白还可用于诊断及治疗上述各种疾病。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024 NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与CAK1抗原的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为CAK1抗原9.02。

由于如上所述CAK1抗原9.02蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的CAK1抗原9.02蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新CAK1抗原9.02蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——CAK1抗原9.02以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码CAK1抗原9.02的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码CAK1抗原9.02的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产CAK1抗原9.02的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——CAK1抗原9.02的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——CAK1抗原9.02的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与CAK1抗原9.02异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。