[发明专利]一种新的多肽——人RING指蛋白42和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人RING指蛋白42，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

泛素系统是生物体内广泛存在的一个重要的调控途径，其涉及体内各种相关蛋白的选择性降解过程。蛋白的泛素化过程主要涉及三个蛋白酶家族的共同作用：泛素活化酶E1蛋白酶家族、泛素结合酶E2蛋白酶家族及泛素蛋白连接酶3蛋白酶家族。其中，E3可能直接参与泛素的最终转移及蛋白的泛素化过程。首先，泛素蛋白的COOH末端与泛素活化酶E1形成硫酯键而被活化，然后被转移给E2或泛素结合酶家族的一员，最后直接或通过泛素-蛋白连接酶E3把泛素转到目标蛋白的赖氨酸残基上。E3为在底物上形成多泛素链所必需的，这一步骤便于26S大小的蛋白酶体有效地识别底物，并促进蛋白的泛素化及降解过程的发生。

研究发现，泛素结合酶E2在生物体内与众多蛋白结合以促进蛋白的泛素化过程，其中一些蛋白的蛋白序列中含有保守的RING指结构，这些蛋白构成了一独立的蛋白家族，即RING指蛋白家族。该蛋白家族的成员作为泛素结合酶E2的作用底物与E2结合，并在多种非相关RING指蛋白如BRCA1、Siah-1、TRC8、NF-X1、kf-1及Praja1等的协同作用下完成其泛素化过程。这些蛋白主要通过泛素化过程以调控体内各种蛋白的水平。

1999年，Kevin等人又从鼠中克隆得到了一新的含RING指结构的蛋白---AO7。该蛋白亦是生物体内泛素结合酶E2的作用底物，其与E2结合并在多种非相关RING指蛋白的协同作用下，以完成其泛素化过程。该蛋白的氨基酸序列中含有保守的RING指结构，该结构域是蛋白泛素化的重要活性中心。而蛋白的泛素化是蛋白调控体内相关蛋白水平的重要途径。由上可知，该蛋白的突变或表达异常将导致体内相关蛋白含量的异常，进而引发各种与之相关的代谢或发育紊乱性疾病[Kevin L.Lorick，Jane P.Jensen et al.，1999，Prog Natl Acad SciUSA，96：11364-11369]。

本发明的新的人蛋白与已知的鼠RING指蛋白在蛋白水平上有84％的同一性和88％的相似性，且其蛋白序列中亦含有保守的RING指结构。由此可知，该蛋白为一种新的人RING指蛋白，命名为人RING指蛋白42。该蛋白与已知的鼠RING指蛋白具有相似的结构特征，且两者具有相似的生物学功能。该蛋白在生物体内调控着多种蛋白在体内的表达量，其突变或表达异常通常与体内多种组织的发育及代谢紊乱性疾病相关。其还可用于诊断及治疗上述各种相关的疾病。

由于如上所述人RING指蛋白42蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人RING指蛋白42蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人RING指蛋白42蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人RING指蛋白42以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人RING指蛋白42的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人RING指蛋白42的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人RING指蛋白42的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人RING指蛋白42的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人RING指蛋白42的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人RING指蛋白42异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少85％相同性的多核苷酸。