[发明专利]一种新的多肽——人铜转运蛋白11.77和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人铜转运蛋白11.77，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

子氧对所有的生物的存活都是至关重要的。在人类中，铜在氧化催化中起作用，它使得许多酶的电子传递变得容易了。这些酶在铁平衡，细胞呼吸，抗氧化防御，神经递质的生物合成，结缔组织形成，色素合成和内分泌器官调节等许多方面起作用。另一方面，多余的铜对机体是有毒的，因此，机体存在一套高度特异的系统来运输和划分这种金属。

人们通过两种遗传疾病了解了细胞铜平衡的机制，这两种病是维尔森氏症(Wilson disease)和蒙克氏症(Menkes disease)。这两种疾病都是由于阳离子转运P类型ATP酶家族的同源成员的缺乏或者功能不良造成的。这些蛋白存在于高尔基体网络的内部，将铜转运到分泌通路中，再将其分泌或整合到新合成的铜蛋白中。最近，在酵母内发现了一种ATP酶的人HAHl蛋白，Ccc2p。它与多铜氧化酶Fet3p一起在铜和铁的代谢中起作用。在人中发现的铁平衡蛋白(也是Fet3p的人HAHl蛋白)血浆铜兰蛋白(ceruloplasmin)表明细胞铜和铁的代谢机制在进化中是非常保守的。

在酵母中，ATXl基因编码一种细胞铜结合蛋白，是sodl突变体的多拷贝抑制蛋白，功能是保护细胞不受铜依赖的毒性的侵害。缺乏ATXl的酵母会被高量铁的摄入所损伤，这一损伤是由于铜离子不能运输到Cccc2p上，因而不能进入分泌通路，并与Fet3p结合而造成的。

HAHl是人的ATXl的人HAHl蛋白。它在人体内广泛表达，表达量较高。在铜离子的平衡以及抗氧化防御中起作用。另外，它还可能在阿尔兹海默氏症中起作用。【JBC，Volume 272，Number 14，Issue of April 4，1997 pp.9221-9226】

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人HAHl蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人铜转运蛋白11.77。

由于如上所述人铜转运蛋白11.77蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人铜转运蛋白11.77蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人铜转运蛋白11.77蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人铜转运蛋白11.77以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人铜转运蛋白11.77的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人铜转运蛋白11.77的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人铜转运蛋白11.77的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人铜转运蛋白11.77的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人铜转运蛋白11.77的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人铜转运蛋白11.77异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中320-643位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1214位的序列。