[发明专利]一种新的多肽——人semaphorin蛋白9和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人semaphorin蛋白9，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

在脊椎动物和非脊椎动物中，semaphorin基因家族蛋白起着生长锥指导信号的作用。生物学家新近发现了5个semaphorin蛋白家族新成员，它们是semaphorinA-E。鼠科动物的胚胎的轴突在选择其路径前或期间，semaphorin基因差异性表达于中胚层和神经外胚层。研究表明，semaphorin蛋白家族成员中各式分子能为无法接触生长锥的区域提供特异性当地信号。

Semaphorin蛋白家族至少可以分为4个亚家族。亚家族I包括非脊椎动物的semal蛋白，它们与semaphorin结构域有60％的相同性[Kolodkin，A.L.，Matthes，D.J.，Oconnor，T.P，

Et al.，1993.Cell.9，831-845]。亚家族II包括果蝇sema11基因(其蛋白在蛋白质水平上与G-Sema1有34％的相同性和60％的相似性)，并且该蛋白可能是分泌性蛋白。亚家族III由脑衰蛋白组成，它在人和鼠科动物中的同系物是sema111和semD以及两个鼠科动物的相关基因semA，semD。亚家族IV包括鼠科动物的SemB和SemC蛋白。到目前为止，所有的semaphorin蛋白都含有保守的12个半胱氨酸残基和一个可能的N糖基化位点。

在脊椎动物的发育过程中，脊柱的感觉轴突和运动轴突是靠识别骨骼肌和皮肤中的特异性外围靶蛋白来传递刺激的[Honig，M.G.，Lance-Jones，C.，andLandmesser，L.1986.Dev.Biol.118，

532-548]。实验表明感觉和运动神经元在寻找路径的关键时期能激活semaphorin基因的表达[Altman，J.，andBayer，S.A.1984.J.Cell.Biol.106，1281-1288]。SamD和samE蛋白就能在正确的位点(E10，E11，E12)为脊椎神经元提供一些必要的信号。

Semaphorin蛋白可能被作为排斥性信号的特异性神经元所识别，亦可能参与其他器官组织的分化。

本发明人的多肽与semaphorin蛋白在蛋白质水平上有97％的相同性和98％的相似性，并具有相似的结构特征，同属于semaphorin蛋白家族，命名为semaphorin9，同时推测其具有相似的生物学功能。

由于如上所述人semaphorin蛋白9蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人semaphorin蛋白9蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人semaphorin蛋白9蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人semaphorin蛋白9以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人semaphorin蛋白9的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人semaphorin蛋白9的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人semaphorin蛋白9的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人semaphorin蛋白9的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人semaphorin蛋白9的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人semaphorin蛋白9异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少98％相同性的多核苷酸。