[发明专利]一种新的多肽——人含P结构域的蛋白10和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人含P结构域的蛋白10，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

许多胞外蛋白，包括细胞表面受体，胞外基质分支和血液凝集级联系统分子等，都包含一些共同的结构域。因为这些蛋白都与结合蛋白有关，因此这些结构域也和调节蛋白-蛋白之间相互作用相关。其中的一种结构域称为P结构域。

P结构域又称三叶草结构域，是一种富含半胱氨酸的序列。P结构域由大约50个氨基酸构成，含有6个高度保守的半胱氨酸残基。它们形成3个分子内的二硫键(Cys1与Cys5，Cys2与Cys4，Cys 3与Cys6)。这6个半胱氨酸之间的距离也是几乎不变的。只有Cys1和Cys2之间的距离会有一些微小的变化。P结构域可用图示表示如下：

             +-------------------------+

             |            +-----------+|

             |            |           ||

           xxCxxxxxx+xxCG#xxxxxxxCxxxxCC#xxxxxxxxWC#xxxxxxxx

                    *************|*******         |

                                 |                |

                                 +----------------+其特征性的保守序列为：[KR]-x(2)-C-x-[FYPST]-x(3，4)-[ST]-x(3)-C-x(4)-C-C-[FYWH]

P结构域与表皮生长因子EGF和类EGF重复序列相似，因此含P结构域的蛋白可能同样起到调制细胞生长的作用，还可能起神经肽的作用。另一方面，P结构域蛋白还可能应答更加广泛的相互作用，例如粘蛋白，雌激素，肿瘤启动子TPA，原癌蛋白c-Ha-ras和c-jun等。

P结构域蛋白与一些疾病有关。例如，pS2和hSP(两种P结构域蛋白)，在一些上皮肿瘤中表达，包括胆管，脾脏，卵巢和胃肠管等。另外，pS2在雌激素诱导的MCF-7乳腺癌细胞株中也发现有表达。在人类胃肠道粘膜溃疡中，尤其是在克容氏症(Crohn’s disease)中，三种P结构域蛋白(pS2，hP1.B和hSP)都表达。【TrendsBiochem.Sci.18：239-243(1993)】

本发明的多肽含有P结构域的特征性保守序列，因此是一种新的含P结构域的蛋白，具有类似的生物学功能，并命名为人含P结构域的蛋白10。

由于如上所述人含P结构域的蛋白10蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人含P结构域的蛋白10蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人含P结构域的蛋白10蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人含P结构域的蛋白10以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人含P结构域的蛋白10的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人含P结构域的蛋白10的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人含P结构域的蛋白10的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人含P结构域的蛋白10的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人含P结构域的蛋白10的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人含P结构域的蛋白10异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；