[发明专利]一种新的多肽——精子受体蛋白12和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽__精子受体蛋白12，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

许多受体相似的真核生物糖蛋白都有一个包含260个氨基酸的结构域。

这些真核生物糖蛋白是由各种不同的结构域组成的嵌合蛋白，并且都有一个大的分子外区域，该分子外区域后跟着的要么是一个转膜区域和一个非常短的细胞质区域，要么是一个GPI-锚。由这个260个氨基酸的结构域普遍存在于上述糖蛋白中，生物学家将它取名为ZP结构域，它位于分子外区域的C末端分泌部分。ZP结构域包含8个参与二硫键形成的保守半胱氨酸残基。ZP结构域的中心部分包含以下一个特征模式序列，其中有2个保守半胱氨酸残基：[LIVMFYW]-x(7)-[STAPDNL]-x(3)-[LIVMFYW]-x-[LIVMFYW]-x-[LIVMFYW]-x(2)-C-[LIVMFYW]-x-[ST]-[PSL]-x(2，4)-[DENS]-x-[STADNQL F]-x(6)-[LIVM](2)-x(3，4)-C。两个C表示两个保守半胱氨酸残基。

卵母细胞周围的分子外基质有一个由糖蛋白ZP1，ZP2和ZP3组成的透明带，该透明带负责诱导顶体反应[Yanagimachi，R.1988.in：The physiology ofreproduction(Knobil，E.And Neill.j.eds.)Vol.1，135-185.]。ZP3第一个与特异结合于精子蛋白[Leytus，L.and Saling，P.M.1989.Ce1157，1123-1130]，从而调节精子与卵母细胞的结合。ZP2接着作为第二个精子受体进一步加强该紧密结合反应[Bleil，J.D.C.，Greve，J.M.and Wassarman，P.M et al.，1981.Dev.Biol.86，189-197]。ZP1交连ZP2和ZP3，ZP2和ZP3可能形成二聚体或高级低聚物。对于上述分子机制的研究对于安全避孕品的研制有重要意义。

另外在TGF-β受体III，酶原粒膜糖蛋白GP-2和uromodulin组成嵌合蛋白的一个新家族。该新家族亦含有ZP结构域。

在上述糖蛋白中，ZP结构域通常都位于相似的跨膜区域，并且这些糖蛋白也有相似的生化特征：[1]都以可溶形式存在[2]糖基化作用非常普遍[3]在不同的组织都有大量表达。

由于如上所述精子受体蛋白12蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的精子受体蛋白12蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新精子受体蛋白12蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——精子受体蛋白12以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码精子受体蛋白12的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码精子受体蛋白12的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产精子受体蛋白12的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——精子受体蛋白12的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——精子受体蛋白12的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与精子受体蛋白12异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中273-608位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1713位的序列。