[发明专利]一种新的多肽——核糖体蛋白S14和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——核糖体蛋白S14，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

蛋白质正确翻译对所有细菌及高等生物都是非常重要的，对蛋白翻译调控机制的研究是从大肠杆菌中得到的。蛋白的翻译过程主要由各种氨酰基-tRNA合成酶、各种tRNA及核糖体共同作用来完成，其中核糖体和其他辅助因子在一起提供了翻译过程的全部酶活性，这些酶活性只有在核糖体整体结构完整的情况下才会具备。因而，核糖体及其组成的各亚单位在生物体内协同作用，起着重要的生理学功能。

核糖体蛋白S14是核糖体小亚基的组成蛋白之一。在大肠杆菌中，S14蛋白是集合30S亚基所必须的，同时也是负责16SrRNA构造A位点的决定作用。在蛋白质氨基酸序列相似的基础上，S14属于一个核糖体蛋白家族。

核糖体蛋白S14是核糖体蛋白小亚基的蛋白之一。人核糖体蛋白S14基因有5.9kb，包括5个外显子和4个内含子，有TATA前导序列，该TATA序列可能是RNA聚合酶I的结合位点之一，且侧翼序列和插入序列的嘧啶含量特别高。

S14蛋白由53-115个氨基酸残基组成。在蛋白质中心区域的几个保守位点有以下特征模式序列：[RP]-x(0，1)-C-x(11，12)-[LIVMF]-x-[LIVMF]-[SC]-[RG]-x(3)-[RN]。

核糖体蛋白S14对于蛋白质的翻译过程有着重要的作用，如果缺失或对其进行化学修饰，或编码它的基因发生突变，都会影响核糖体的功能，降低多肽合成的活性。虽然，对核糖体蛋白S14的功能研究还不够透彻，但根据种种研究结果，可以证明，核糖体蛋白S14的功能包括：(1)对rRNA折叠成有功能的三维结构是十分重要的；(2)在蛋白质合成中，核糖体的空间构象发生一系列的变化，核糖体蛋白可能对核糖体的构象起“微调”作用；(3)在核糖体的结合位点上甚至可能在催化作用中，核糖体蛋白与rRNA共同行使功能。

由于如上所述核糖体蛋白S14蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的核糖体蛋白S14蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新核糖体蛋白S14蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——核糖体蛋白S14以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码核糖体蛋白S14的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码核糖体蛋白S14的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产核糖体蛋白S14的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——核糖体蛋白S14的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——核糖体蛋白S14的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与核糖体蛋白S14异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中232-609位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1308位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制核糖体蛋白S14蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。