[发明专利]一种新的多肽——人细胞周期蛋白G29.13和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人细胞周期蛋白G29.13，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

由p53肿瘤抑制蛋白转录激活的靶基因。P53肿瘤抑制基因的产物诱导受到基因毒性损伤(DNA损伤)细胞的细胞周期停滞或细胞凋亡。细胞周期蛋白家族成员通过与由cdk基因家族编码的催化亚基作用，调节细胞生长，并调节细胞周期蛋白依赖的激酶活性。这些激酶的活性对于通过细胞周期不同阶段的进程是至关重要的，至少有几种细胞周期蛋白还参与调节细胞凋亡以及转录。细胞周期蛋白G是一种对p53应答的基因，并介导p53的功能(Okamoto Kand Beach D.(1994).EMBO J.，13，4816-4822)。

细胞周期蛋白可分为三类。第一类由细胞周期蛋白A，B，D1，D2，E以及F构成，具有调节细胞周期的作用。细胞周期蛋白C与H形成了第二类，在转录调节中起作用：细胞周期蛋白H是转录复合物TFIIH的一种成分，而细胞周期蛋白C与RNA多聚酶II中的一种成分SRB11相似。细胞周期蛋白H与其激酶伴侣，cdk7结合并作为一种CAK激活cdc2，cdk2以及cdk4。细胞周期蛋白G1，G2以及I形成细胞周期蛋白家族中的第三类亚群，这三种蛋白行使与细胞周期或诸如对基因毒性损伤应答而介导一个关卡的转录调节截然不同的功能(Feaver WJ，Svejstrup JQ，Henry NL and Kornberg RD.(1994).Cell，79，1103-1109)。

细胞周期蛋白G1与G2由高度同一的两个基因编码，但G2的氨基酸序列比G1的长得多，G2长出的C-端氨基酸中含有一段PEST序列，与细胞周期蛋白C，D及E中的相似。G1与G2在乳腺癌，骨肉瘤，肺癌以及膀胱癌细胞，成纤维细胞中都有表达，但G1在宫颈癌中无表达，而G2却在宫颈癌中特异性表达。细胞周期蛋白G2对于DNA损伤的应答起作用，因而它的缺失或突变会引起各种癌症等疾病，例如乳腺癌，骨肉瘤，肺癌膀，胱癌以及宫颈癌等(Stewart Bates，SheldonRowan and Karen H Vousden，Oncogene(1996)13，1103-1109)。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人细胞周期蛋白G2的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人细胞周期蛋白G29.13。

由于如上所述人细胞周期蛋白G29.13蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人细胞周期蛋白G29.13蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人细胞周期蛋白G29.13蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人细胞周期蛋白G29.13以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人细胞周期蛋白G29.13的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人细胞周期蛋白G29.13的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人细胞周期蛋白G29.13的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人细胞周期蛋白G29.13的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人细胞周期蛋白G29.13的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人细胞周期蛋白G29.13异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：