[发明专利]一种新的多肽——磷酸二酯酶10.12和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——磷酸二酯酶10.12，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

(cAMP)调节对于非脊椎动物和哺乳动物的中枢神经系统(CNS)是非常重要的。对两种不同的非脊椎动物研究表明环腺甘酸在学习和记忆中亦有相关作用。神经元的变化直接和环腺甘酸信号途径的几种组分活性的改变相关，尤其是腺甘酸环化酶和一个依赖环腺甘酸的蛋白质激酶活性的改变[Schacher，S.，D.Glanzman，A.Barzilai，P.Dash，S.G.N.Grant，F.Keller，M.et al.，1990.Cold Spring HarborSymp.Quant.Biol.55：187-202]。在Drosophila melanogaster中发现并分离出了许多与学习有关的突变体，包括一个编码环腺甘酸特异性磷酸二酯酶(PDE)的dunce(dnc)和一个编码钙调蛋白刺激性腺甘酸环化酶的rutabaga(rut)[Levin，L.R.，P.L.Han，P.M.Hwang，P.G.et al.，1992.Cell68：479-489]。人的基因组中有一个基因与dnc记忆和学习基因的同源性非常大，它有4个不同的表达蛋白，其中3个是环腺甘酸特异性磷酸二酯酶，且能被抗抑郁症药rolipram抑制。由于它们广泛表达于脑和其他组织并同时被精神疾病相关药物抑制，表明人的环腺甘酸特异性磷酸二酯酶起着非常重要的作用。哺乳动物的磷酸二酯酶按照生化特征和药理学特征可以分为以下几个亚类：钙调蛋白依赖性磷酸二酯酶；cGMP刺激性磷酸二酯酶；cGMP抑制性磷酸二酯酶；cAMP特异性磷酸二酯酶；cGMP特异性磷酸二酯酶；光受体磷酸二酯酶；高亲和性，cAMP特异性磷酸二酯酶。所有的脊椎动物和昆虫的磷酸二酯酶都有一个相似的结构域，位于C末端整个蛋白质的1/3处，各个磷酸二酯酶之间在蛋白质水平上有28％-34％的相同性[Michaeli，T.，T.J.Bloom，T.Martins，K.Loughney etal.，1993.J.Biol.Chem.268：

12925-12932]。而dnc蛋白以及它的人类同系物都包含一个家族特异性N末端序列结构域。

有证据表明，哺乳动物的cAMP特异性磷酸二酯酶及dunce相似磷酸二酯酶是体内rolipram和其抑制剂的主要靶蛋白。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与磷酸二酯酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为磷酸二酯酶10.12。

由于如上所述磷酸二酯酶10.12蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的磷酸二酯酶10.12蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新磷酸二酯酶10.12蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——磷酸二酯酶10.12以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码磷酸二酯酶10.12的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码磷酸二酯酶10.12的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产磷酸二酯酶10.12的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——磷酸二酯酶10.12的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——磷酸二酯酶10.12的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与磷酸二酯酶10.12异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：