[发明专利]一种新的多肽——人karyopherin3蛋白56.1和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人karyopherin3蛋白56.1，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

大的细胞器，载有全部基因组的染色体。它是基因复制、RNA转录的中心，是细胞生命活动控制中心。真核生物的细胞内有核膜将胞质和核质分开，其DNA复制、RNA转录在核内进行，而mRNA及核糖体则转运到胞质中进行蛋白质的转译。期间，核糖体及RNA的转运由多种蛋白来协调作用完成。karyopherinl蛋白介导多种调控蛋白的细胞核内定位过程；karyopherin2蛋白则在细胞内调控多种蛋白与mRNA的作用及相互作用。近年，人们发现除上述两种蛋白外，细胞内还存在一种蛋白即karyopherin3蛋白。该蛋白在细胞的蛋白转录表达过程中亦起着十分重要的作用，其调控着核内核糖体蛋白的转运及相关调控蛋白的转运。

人们早已从不同的生物体内克隆得到了karyopherin1及karyopherin2两种蛋白，并对它们的结构及生物学活性进行了详细的研究。1997年，Nabeel等人又从人中克隆得到了一新的karyopherin蛋白，该蛋白在生物体内亦参与调控多种蛋白的转录与表达。研究发现，该蛋白为一种核转录因子，在生物体内介导核糖体蛋白在细胞核内的转运。其通常存在于细胞胞质、细胞核，尤其是核边缘区域。该蛋白的蛋白序列中含有两个Ran结合结构域，在生物体内负责蛋白与Ran-GDP的结合与相互作用[Nabeel R.Yaseen，Gunter B1obel et al.，1997，ProcNatl Acad Sci USA，94：4451-4456]。

众所周知，核糖体蛋白的转运是细胞内核糖体形成及蛋白转录、表达的重要步骤。karyopherin3蛋白即在核糖体蛋白的转运及蛋白转录、表达过程中其重要的调控作用，该蛋白的突变或表达异常将直接影响生物体内相关蛋白的转录与表达，进而引发各种相关的发育及代谢紊乱性疾病。该蛋白在生物体内通常与相关的代谢及发育紊乱性疾病、一些恶性肿瘤及癌症等疾病的发生密切相关。其还可用于诊断及治疗上述各种相关的疾病。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人karyopherin3蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人karyopherin3蛋白56.1。

由于如上所述人karyopherin3蛋白56.1蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人karyopherin3蛋白5 6.1蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人karyopherin3蛋白56.1蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人karyopherin3蛋白56.1以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人karyopherin3蛋白56.1的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人karyopherin3蛋白56.1的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人karyopherin3蛋白56.1的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人karyopherin3蛋白56.1的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人karyopherin3蛋白56.1的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人karyopherin3蛋白56.1异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQIDNo.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQIDNO：2氨基酸序列的多肽。