[发明专利]一种新的多肽——人CAD蛋白9.02和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人CAD蛋白9.02，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

内的核酸是由核苷酸组成的长链多聚物，核苷酸的顺序存储着染色体携带的全部遗传信息。核苷酸又可分为两类，即嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸。这两种核苷酸作为遗传物质的组成单位结合在一起，传递着生物体内的遗传信息。由此可知，核苷酸的生物合成对所有的细胞来说都是极为重要的，其是合成RNA和DNA所必需的前体，决定着各组织细胞的生长与发育。

CAD蛋白是一种三功能酶，在生物体嘧啶合成过程中起着重要的调节作用，其同时具有氨甲酰磷酸合成酶、天冬氨酸转氨甲酰酶及二氢乳酸酶三种酶催化活性。该蛋白在生物体内催化嘧啶核苷酸合成的起始几个步骤，其主要存在于哺乳动物的肝脏组织中，氨甲酰磷酸合成酶还是尿素循环中的一个重要的调控蛋白。在嘧啶核苷酸合成过程中，氨甲酰磷酸合成酶先催化形成氨甲酰磷酸；氨甲酰磷酸再与天冬氨酸，在天冬氨酸氨甲酰转移酶的催化下形成氨甲酰天冬氨酸；而嘧啶环的形成则由二氢乳酸酶催化完成。由此可知，CAD作为一种三功能酶在嘧啶核苷酸的形成过程中起着极为重要的作用。

1996年，Lawahana等人又从人中克隆得到了一新的人CAD蛋白。该蛋白亦在人的嘧啶核苷酸合成过程中起重要的调控作用，其具有氨甲酰磷酸合成酶、天冬氨酸氨甲酰转移酶及二氢乳酸酶三种酶催化活性，在生物体内参与调控嘧啶核苷酸的起始合成[Lwahana H.，Fujimura M.et al.，1996，Biochem Biophys ResCommun，219(1)：249-255]。由上可知，CAD蛋白在生物体遗传物质的合成过程中起着极为重要的调控作用，该蛋白的突变或表达异常将直接影响体内遗传信息的组成，进而影响相关组织与细胞的正常发育及生长。该蛋白在体内通常与各种相关的发育及代谢紊乱性疾病、相关组织的肿瘤及癌症等疾病的发生密切相关。其还可用于诊断及治疗上述各种疾病。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人CAD蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人CAD蛋白9.02。

由于如上所述人CAD蛋白9.02蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人CAD蛋白9.02蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人CAD蛋白9.02蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人CAD蛋白9.02以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人CAD蛋白9.02的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人CAD蛋白9.02的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人CAD蛋白9.02的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人CAD蛋白9.02的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人CAD蛋白9.02的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人CAD蛋白9.02异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。