[发明专利]一种新的多肽——人层粘连蛋白γ3链(LAMC3)69.85和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人层粘连蛋白γ3链(LAMC3)69.85，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

膜中的大型糖蛋白，它是异源三聚体分子(Ekblom，P.，and R，Timpl.1996.The Laminins.In Cell Adhesion and Communication.Vol.2.C.Goridis.editor.Harwood Academic Publishers，The Netherlands.321 pp.)。层粘连蛋白是十字交叉型的，有一个单一的长臂，自三条遗传上不同的多肽链的卷曲螺旋作用中伸出，还有三个N-端短臂。三个亚基链被称为alpha，beta，以及gamma。这三条链都具有被N-端短臂中的多重类表皮生长因子域隔开的球型域。它们的长臂部分由七个alpha-螺旋卷曲螺旋蛋白中典型的重复构成。层粘连蛋白广泛的功能衍生自它们的结构以及信号作用，它们与形成以及稳固基底膜，稳定细胞与基底膜的连接以及通过占据细胞表面受体来介导细胞骨架重排有关(Ryan，M.C.，R.Tizard，D.R.VanDevanter，J.Biol.Chem.269：22779-22787，(1994))。

近来发现一种新的gamma链，gamma3链是分布在传统的基底膜以外的新的层粘连蛋白类型，该链中含有gamma链中所有的区域，包括两个共有的糖基化位点以及一个巢蛋白结合位点，这些都表明含有gamma3蛋白的层粘联蛋白存在于稳固的基质中。Gamma3链广泛表达于皮肤，心脏，肺，以及生殖道中。在皮肤，gamma3蛋白存在于神经穿刺位点的皮层接点的基底膜中。Gamma3链还是肺，输卵管，附睾，输精管以及生精小管纤毛上皮细胞的顶端表面的主要成分。含有gamma3的层粘连蛋白在各种上皮组织顶端表面的分布说明它们不存在于超微结构定义的基底膜中。这些顶端层粘连蛋白在这些细胞中的纤毛进程的形态发生以及结构稳定性中十分重要。Gamma3基因被定位于染色体的9q31-q34位上，这一区域与四种不同程度的神经功能异常相关：福山性先天性肌营养不良(综合征)(唯一中常染色体隐性遗传性肌萎缩，婴儿尤为明显，肌异常类似杜兴肌营养不良，患者智力迟钝，伴多小脑回及其他大脑异常)；肌肉-眼睛-脑综合征；沃-瓦综合征(一种先天性综合征，通常在一岁前即死亡，包括脑积水，无脑回，各种眼异常，诸如视网膜发育不全，角膜混浊或小眼，有时为脑突出)；以及眼点-21视网膜炎伴随耳聋(RP-21)。而gamma3基因尤其与RP-21相关，该基因突变或缺失会引发RP-21(Manuel Koch，Pamela F.Olson，Journal of Cell Biology，Vol.145，No.3，(1999)605-617)。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人层粘连蛋白γ3链(LAMC3)的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人层粘连蛋白γ3链(LAMC3)69.85。

由于如上所述人层粘连蛋白γ3链(LAMC3)69.85蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人层粘连蛋白γ3链(LAMC3)69.85蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人层粘连蛋白γ3链(LAMC3)69.85蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人层粘连蛋白γ3链(LAMC3)69.85以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人层粘连蛋白γ3链(LAMC3)69.85的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人层粘连蛋白γ3链(LAMC3)69.85的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。