[发明专利]一种新的多肽——人TFIID亚基p30beta蛋白12.54和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人TFIID亚基p30beta蛋白12.54，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

ATA-结合蛋白，TBP)是一种在激活由RNA多聚酶II转录的真核生物基因中起主要作用的基本因子，TBP-相关因子(TAFs)介导激活剂以及亚基间作用的功能并与之作用。TFIID与紧密位于转录起始处的TATA盒启动子元件特异性结合，使染色质内的启动子开始转录，并介导转录激活剂的作用，这一现象与增强的TFIID补充或TFIID-启动子复合物中的构象变化有关。不同真核生物来源的TFIID约180个残基的C-端域具有程度显著的序列保守性，该区域对于结合TATA盒是必须且足够的，该区域最为显著的结构特征是存在有两个保守的77个氨基酸域的重复。TFIID分子内对称性产生一个跨坐于DNA上的马鞍型结构。该蛋白中还有一个组蛋白类八聚体的TAF复合物。TFIID家族的序列特征模板为重复域的最后50个残基：Y-x-P-x(2)-[IF]-x(2)-[LIVM](2)-x-[KRH]-x(3)-P-[RKQ]-x(3)-L-[LIVM]-F-x-[STN]-G-[KR]-[LIVM]-x(3)-G-[TAGL]-[KR]-x(7)-[AGC]-x(7)-[LIVM]。TFIID独特的N-端结构参与物种特异性调节因子的反应(Nikolov D.B.，Hu S.-H.，Lin J.，Gasch A.，Hoffmann A.，Horikoshi M.，Chua N.-H.，RoederR.G.，Burley S.K.Nature 360：40-46(1992))。

真核生物中的TFIID亚基p30beta蛋白在C-端有较高的保守性，而N-端保守性较低。该蛋白氨基酸序列中有三个酸性与碱性的区域交替排列。在N-端区域有蛋白激酶的靶位点以及一个核定位信号(NLS)。TFIID亚基p30beta蛋白的氨基酸序列中有一些特征序列模板，包括：1)同向重复，2)一个与组氨酸H4相似的区域，位于两个同向重复的序列之间，3)位于螺旋域的酸性以及疏水性氨基酸表面。倘若TFIID亚基p30beta蛋白缺失或发生突变会影响转录起始的准确性，并影响TFIID与其他调节因子的作用，从而引发各种癌症等疾病，并且是特定神经疾病的病原(Kuzuhara，T.and Horikoshi，M.，Biol.Pharm.Bull.19(1)，122-126(1996))。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人TFIID亚基p30beta蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人TFIID亚基p30beta蛋白12.54。

由于如上所述人TFIID亚基p30beta蛋白12.54蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人TFIID亚基p30beta蛋白12.54蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人TFIID亚基p30beta蛋白12.54蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人TFIID亚基p30beta蛋白12.54以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人TFIID亚基p30beta蛋白12.54的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人TFIID亚基p30beta蛋白12.54的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人TFIID亚基p30beta蛋白12.54的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人TFIID亚基p30beta蛋白12.54的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人TFIID亚基p30beta蛋白12.54的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。