[发明专利]一种新的多肽——羧酸脂酶21和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——羧酸脂酶21，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

脂类是一类重要的化学物质，具有重要的生物学功能。磷脂是所有细胞的生物膜的组成部分。脂类物质还是机体代谢所需燃料的储存形式和运输形式。脂类物质也可为动物机体提供溶解于其中的必需脂肪酸和脂溶性维生素。脂类作为细胞的表面物质，与细胞识别、种特异性和组织免疫性有密切关系。因此，脂类的代谢是非常重要的。

脂酶是将脂类水解成醇或者酸的一类酶。高等真核生物有许多不同的脂酶，其中一类脂酶作用于羧酸脂。羧酸脂酶可以依据其被有机磷酸脂所抑制情况的不同分为三种(A,B,C)。A类主要在肝脏、睾丸、肺、前列腺和胰脏中表达；B类主要在肝脏、肾脏、小肠、肺、脾脏、心脏和脑中表达；C类在肝脏和肾脏中表达。羧酸脂酶在许多的细胞器中都有发现，在肝脏的与内质网腔面松散接触的微粒体中含量最高。

羧酸脂酶的催化位点包括三个氨基酸残基(丝氨酸、谷氨酸或天冬氨酸、组氨酸)组成的核心。在这个核心周围的序列也是高度保守的。另一个保守的序列是N端的区域。它包括一个半胱氨酸残基，与二硫键的形成有关。保守序列1:F-[GR]-G-x(4)-[LIVM]-x-[LIV]-x-G-x-S-[STAG]-G

其中S是活性位点。保守序列2:ED]-D-C-L-[YT]-[LIV]-[DNS]-[LIV]-[LIVFYW]-x-[PQR]

其中C是二硫键形成位点。

羧酸脂酶在脂类，包括胆固醇、甾体激素的代谢中起重要作用。除此以外，羧酸脂酶还可以催化转脂反应，将可卡因(一种甲基脂)转变为相应的乙烷脂形式。羧酸脂酶水解药物和有毒物质的脂基团。因此在这些物质的代谢和解毒作用中其重要作用。在人类中，可卡因和海洛因在血清和肝脏组织中被水解成去脂化的代谢产物并随尿液排泄出体外。羧酸脂酶还可能在细胞物质运输上起一定的作用。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与羧酸脂酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为羧酸脂酶21。

由于如上所述羧酸脂酶21蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的羧酸脂酶21蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新羧酸脂酶21蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——羧酸脂酶21以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码羧酸脂酶21的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码羧酸脂酶21的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产羧酸脂酶21的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——羧酸脂酶21的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——羧酸脂酶21的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与羧酸脂酶21异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中107-685位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-982位的序列。