[发明专利]一种新的多肽——天冬氨酸和鸟氨酸转氨甲酰酶11和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--天冬氨酸和鸟氨酸转氨甲酰酶11，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

天冬氨酸和鸟氨酸转氨甲酰酶是一种催化天冬氨酸和甲酰基磷酸转移至氨甲酰天冬氨酸的酶，这个步骤是嘧啶核甘酸从头合成中的第二步。原核生物的天冬氨酸和鸟氨酸转氨甲酰酶由两个亚基组成：一条由pyrB基因编码的催化链和一条由pyrⅠ基因编码的调节链。真核生物类似天冬氨酸和鸟氨酸转氨甲酰酶只是一个多功能酶中的一个结构域，它除了上述步骤外，还催化嘧啶从头合成的其它步骤。

鸟氨酸转氨甲酰酶催化鸟氨酸和甲酰基磷酸转移至瓜氨酸。在哺乳动物中，该酶参与尿素循环，并且位于线粒体基质中。在原核生物和真核微生物中，该酶参与精氨酸的生物合成。在一些细菌种中，它还参与精氨酸的分解代谢。

有证据表明，这两种酶在进化上是相关的。它们的二级结构和一些序列区域是非常相似的，其中一个区域中的三个氨基酸残基可能参与与甲酰基磷酸的磷酸基团的结合。这两种酶蛋白有几乎一致的大小和折叠方式，但它们的催化位点和几乎所有的保守序列都位于N末端的有氨甲酰磷酸结合的极性结构域。保守序列丝氨酸-苏氨酸-精氨酸-苏氨酸-精氨酸-X-丝氨酸-苯丙氨酸-谷氨酸中的3个氨基酸残基丝氨酸52，精氨酸54和苏氨酸55是氨甲酰磷酸中氨甲酰的结合位点。另一个高度保守的序列，-组氨酸-脯氨酸-苏氨酸-谷氨酰胺-X-亮氨酸-，包括组氨酸134。组氨酸134的咪唑环是与氨基酰磷酸中羧基氧结合的边缘。该残基在鸟氨酸转氨甲酰酶反应中是酸的催化剂。

这两种酶有一个共同的特征序列：F-X-[EX]-X-S-[GT]-R-T。其中，S,R和第二个T结合甲酰基磷酸。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与天冬氨酸和鸟氨酸转氨甲酰酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为天冬氨酸和鸟氨酸转氨甲酰酶11。

由于如上所述天冬氨酸和鸟氨酸转氨甲酰酶11蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的天冬氨酸和鸟氨酸转氨甲酰酶11蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新天冬氨酸和鸟氨酸转氨甲酰酶11蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--天冬氨酸和鸟氨酸转氨甲酰酶11以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码天冬氨酸和鸟氨酸转氨甲酰酶11的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码天冬氨酸和鸟氨酸转氨甲酰酶11的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产天冬氨酸和鸟氨酸转氨甲酰酶11的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--天冬氨酸和鸟氨酸转氨甲酰酶11的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--天冬氨酸和鸟氨酸转氨甲酰酶11的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与天冬氨酸和鸟氨酸转氨甲酰酶11异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中77-373位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2156位的序列。