[发明专利]一种新的人免疫球蛋白受体亚基蛋白及其编码序列无效
申请号: | 00116227.6 | 申请日: | 2000-05-30 |
公开(公告)号: | CN1278004A | 公开(公告)日: | 2000-12-27 |
发明(设计)人: | 李能干;许相儒;肖华胜;杨义生;陈竺;韩泽广 | 申请(专利权)人: | 国家人类基因组南方研究中心 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C07K14/435;C07K16/18;C07H21/00;C12Q1/68 |
代理公司: | 复旦大学专利事务所 | 代理人: | 陆飞 |
地址: | 201203 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 免疫球蛋白 受体 蛋白 及其 编码 序列 | ||
本发明涉及分子生物学、免疫学、生理学以及基因工程等领域。具体地,本发明涉及一种在人类树突状细胞中表达的hHAIERbs-iso2蛋白及其核酸序列。本发明还涉及该蛋白和核酸序列的制备方法和用途。
本发明中,我们在人类树突状细胞中克隆到人的一个高亲和力免疫球蛋白epsilon受体beta亚基(high affinity immunoglobulin epsilon receptor betasubunit,HAIERbs)基因的同源异构体基因(hHAIERbs isoform,hHAIERbs-iso2)。
肥大细胞和嗜碱细胞中,高亲和力免疫球蛋白epsilon受体(high affinityimmuno-globulin epsilon receptor,Fc epsilon RI)在调节绝大多数与变态反应关联的病理生理学现象中起了关键作用。Fc epsilon RI是个四聚复合物,包括了一个alpha亚基、一个beta亚基以及两个gamma亚基。(Biomed Pept ProteinsNucleic Acids 1995;1(2):101-6)。
在本发明被公布之前,尚未有任何公开或报道过本专利申请中提及的人类hHAIERbs-iso2蛋白序列及其核酸序列。
本发明的第一目的就是提供一种新的人基因hHAIERbs-iso2(GenbankAccession No.AF253977),该基因是一个人hHAIERbs-iso2蛋白基因。
本发明的第二目的是提供一种新的人蛋白hHAIERbs-iso2。
本发明的第三目的是提供一种利用重组技术生产上述的新的人hHAIERbs-iso2蛋白和核酸序列的方法。
本发明还提供了这种人hHAIERbs-iso2蛋白多肽和编码序列的应用。
在本发明的一个方面,提供了一种分离出的DNA分子,该分子包括:编码具有人hHAIERbs-iso2蛋白质活性的多肽的核苷酸序列,所述的核苷酸序列与SEQ ID NO.6中从核苷酸第217-966位DNA分子的核苷酸序列有至少70%的同源性;或者所述的核苷酸序列能在中度严紧条件下与SEQ ID NO.6中从核苷酸第217-966位的核苷酸序列杂交。较佳地,所述的序列编码具有SEQ ID NO.7所示的氨基酸序列的多肽。更佳地,所述的序列具有SEQ ID NO.6中从核苷酸第217-966位的核苷酸序列。
在本发明的另一方面,提供了一种分离出的人hHAIERbs-iso2蛋白质多肽,它包括:具有SEQ ID NO.7氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段,或其活性衍生物。较佳地,该多肽是具有SEQ ID NO.7序列的多肽。
在本发明的另一方面,还提供了一种载体,它包含上述的DNA分子。
在本发明的另一方面,还提供了一种用上述载体转化的宿主细胞。在一个实例中该宿主细胞是大肠杆菌;在另一实例中,该宿主细胞是真核细胞。
在本发明的另一方面,还提供了一种产生具有人hHAIERbs-iso2蛋白质活性的多肽的方法,其步骤如下:
(1)将编码具有人hHAIERbs-iso2蛋白活性的多肽的核苷酸序列可操作地连于表达调控序列,形成人hHAIERbs-iso2蛋白表达载体,所述的核苷酸序列与SEQ ID NO.6中从核苷酸第217-966位的核苷酸序列有至少70%的同源性;
(2)将步骤(1)中的表达载体转入宿主细胞,形成人hHAIERbs-iso2蛋白的重组细胞;
(3)在适合表达人hHAIERbs-iso2蛋白多肽的条件下,培养步骤(2)中的重组细胞;
(4)分离出具有人hHAIERbs-iso2蛋白活性的多肽。
较佳地,在该方法中使用的核酸序列具有SEQ ID NO.6中第217-966位的序列。
本发明还提供了与hHAIERbs-iso2蛋白多肽特异性结合的抗体。
在本发明中,“分离的”、“纯化的”或“基本纯的”DNA是指,该DNA或片段已从天然状态下位于其两侧的序列中分离出来,还指该DNA或片段已经与天然状态下伴随核酸的组份分开,而且已经与在细胞中伴随其的蛋白质分开。
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