[发明专利]一种新的多肽——人硫氧还蛋白类似蛋白9.79和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体说，本发明描述了一种新的多肽--人硫氧还蛋白类似蛋白9.79，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

小分子量蛋白，其活性位点相当保守，为Trp-Cys-Gly-Pro-Cys，催化二巯基与二硫键的可逆的氧化还原反应。氧化态的硫氧还蛋白，Trx-S2可以被NADPH和黄素酶硫氧还蛋白还原酶所还原，这被称为硫氧还蛋白系统。而还原态的硫氧还蛋白，Trx-(SH2))，包含两个巯基基团，可以有效的催化许多含暴露的二硫键的蛋白，因此是一种普适的蛋白二硫键还原酶。

硫氧还蛋白在所有生物中都存在。在大肠杆菌中，硫氧还蛋白最先被鉴定为一种核糖核酸还原酶(RNR，一种将核糖核酸还原为脱氧核糖核酸以供DNA合成与修复的酶)的电子供体。在硫同化通路中，硫氧还蛋白还可以作为3’-磷酸腺苷5’-磷酸硫还原酶和甲硫氨酸亚砜还原酶的氢原子的供体。在真核细胞中，硫氧还蛋白同样是RNR,3’-磷酸腺苷5’-磷酸硫还原酶和甲硫氨酸亚砜还原酶的氢原子供体。另外，硫氧还蛋白还有许多其他的功能，例如：1、促进含二硫键的蛋白的重折叠；2、活化白介素2受体；3、调节几种转录因子，(例如NF-κB等)的DNA结合活性；4、刺激淋巴细胞和多种人固体瘤细胞的增殖。5、有效的抗氧化剂，可以还原过氧化氢；去除自由基等，是一种细胞保护蛋白。因此在细胞凋亡中该蛋白也起一定的作用。【JBC,272(49),30841-30847】

硫氧还蛋白与疾病的关系相当密切，例如，在心肌炎中可以发现硫氧还蛋白上调。【FEBS Lett 2000 Apr 21；472(1):109-113】在人癌症组织中可以发现硫氧还蛋白的超量表达，因此该蛋白在肿瘤发生中可能起一定作用。【Cancer Res 2000Apr 15；60(8):2281-9】

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人硫氧还蛋白类似蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人硫氧还蛋白类似蛋白9.79。

由于如上所述人硫氧还蛋白类似蛋白9.79蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人硫氧还蛋白类似蛋白9.79蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人硫氧还蛋白类似蛋白9.79蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人硫氧还蛋白类似蛋白9.79以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人硫氧还蛋白类似蛋白9.79的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人硫氧还蛋白类似蛋白9.79的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人硫氧还蛋白类似蛋白9.79的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人硫氧还蛋白类似蛋白9.79的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人硫氧还蛋白类似蛋白9.79的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人硫氧还蛋白类似蛋白9.79异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。